原文
数量:16 (15)估计散装盐酸二甲双胍和颗粒的离子对液相色谱法
- *通信:
- Pritam s耆那教徒的、医药、质量保证部、r·c·帕特尔医药学院教育和研究,shirpur - 425405,马哈拉施特拉邦,印度,电话:912563255189,传真:912563251808;电子邮件: (电子邮件保护)
收到:09年11月,2016;接受:2016年12月14日;发表:2016年12月18日,
引用:Chalikwar党卫军,沙阿博士,耆那教的PS,估计二甲双胍盐酸散装和颗粒的离子对液相色谱法。肛门化学印第安纳j . 2016; 16 (15): 115。
文摘
一个简单、精确、准确,成本效益和替代权力平等主义的高效液相色谱法的估计方法二甲双胍盐酸散装颗粒配方。色谱分离是实现与Eclipse XDB C18柱(150.00毫米×4.60毫米)利用氯化钠的流动相,戊烷磺酸钠与三乙胺(50.00% W / W)。磷酸添加调整流动相pH值为3.8。这是0.45μ过滤膜过滤和检测进行了使用PDA探测器在233海里。根据我的指导方针,执行验证演示系统适用性,特异性,线性、准确度、精度、检乐动KENO快乐彩测极限,定量的限制,健壮性、强度。线性响应(r2 = 0.999)中观察到的范围25 - 75.00μg mL-1良好的复苏(99.79%到101.75%)。在所有情况下验证验收标准得到满足。因此,该方法可用于药品的常规质量控制分析二甲双胍盐酸。
关键字
盐酸二甲双胍;高效液相色谱法;验证;离子对试剂
介绍
盐酸二甲双胍(遇到),降血糖药化学1,1-dimethylbiguanide盐酸盐图。1(1]。的首选药物2型糖尿病糖尿病。它能改善2型糖尿病患者的糖耐量,降低基础和餐后血糖。它减少肝葡萄糖生产,减少肠道吸收的葡萄糖,改善胰岛素敏感性增加葡萄糖摄取和利用外围(2,3]。
图1:的化学结构二甲双胍盐酸。
各种药典像印度药典1),英国药典(4欧洲药典[],5和美国药典6)描述高效液相色谱法(高效液相色谱)的估计方法。详细的文献调查显示了不同方法估计像反向高效液相色谱法和正常阶段,(7,8)荧光检测(9)毛细管电泳(CE) [10,11紫外分光光度法测定[12,13,14]。一些复杂的技术报告确定了包括质/女士[15)、超临界流体色谱/串联质量光谱法方法(16电位滴定,spectrofluorimetry [17,18)多元技术(19高性能薄层色谱法(20.),超高压液体色谱法(21在人血浆中离子对高效液相色谱法22]。
本研究的目的是建立和验证速度与敏感的离子对高效液相色谱方法。除了它的简单性和敏感性,目前的方法突出了经济一个流动相使用完成缺乏有机溶剂图。2。
图2:离子对色谱法的机制。
离子对试剂是吸引固定相由于其疏水烷基和带电的试剂{C5 -3(戊烷磺酸钠)}从而附着在固定相。
材料和方法
化学药品和试剂
盐酸二甲双胍是获得礼物样本Shreeji医药国际瓦尔道拉(印度)。遇到颗粒是从市场买来的,作为测试样本。戊烷磺酸钠盐(σ),三乙胺(奥德里奇化工公司,Inc .),氯化钠和邻位的磷酸(OPA)用于制备流动相。流动相是0.45μm过滤膜过滤(德国哥廷根)。
设备和色谱条件
安捷伦高效液相色谱系统由一个脱气器G1379B,本泵G1312A,自动注射器G1329A,恒温烤箱G1316A列和多波长检测器G1365B,安捷伦1200系列,这是由一个Chem-station软件控制。所有色谱实验进行的权力平等主义的模式。流动相组成的1.2通用戊烷磺酸钠氯化钠和0.87通用的900毫升的水,3.00毫升50%的三乙胺是添加到它,它是用水稀释至1000毫升。磷酸添加调整pH值为3.8。注射体积是10.00μL和检测在233 nm (LC)的解决方案。流动相流速设定在1.2毫升分钟1和常数列温度是25°C。
准备的解决方案
的股票准确的解决方案是由重达50毫克的认识并转移到50毫升容量瓶,25毫升的水被添加为稀释剂,用近5分钟和体积是马克。最后μg 50毫升的浓度1是通过稀释5毫升的吗股票解决方案与稀释剂100毫升。
分析编制
准确称重20袋的颗粒和平均重量计算。重量相当于500毫克被转移到1000毫升容量瓶;500毫升的稀释剂添加,用30分钟和体积是马克。最后μg 50毫升的浓度1通过稀释5毫升以上解决方案与稀释剂50毫升,透过0.45μm微孔PVDF过滤器过滤0.45μm微孔PVDF过滤器。
验证该方法的有效性
该方法验证指导方针后,国际协调会议(我)乐动KENO快乐彩23]。验证参数;特异性、线性、准确度、精度检测和量化的极限的极限,健壮性、强度和稳定性测定。
适合性测试:系统适用性决定从六个复制注射样品分析前的标准溶液
特异性:研究特异性药物解决μg 50毫升1被注入的列,在优化的色谱条件。
线性:研究了线性浓度范围在25岁以上的- 75μg毫升1。标准校准曲线绘制与五校准器浓度表示一式三份决定在每个级别。峰面积与药物浓度的数据采用线性最小二乘法回归分析。
准确性:精度是由应用的方法一式三份样品混合物的安慰剂已知数量的标准药物添加三个不同层次的分析样品溶液(50%、100%和150%)。%和% RSD在每个级别的计算。
精度:盘中精度进行了研究,interday和可重复性。当天是由分析、三倍的三种不同浓度的药物。Inter-day精度是由三种不同浓度的药物分析连续三天。重复性是由分析相同的浓度药物六次。
检测极限(LOD)和量化的限制(定量限):该方法的灵敏度估计LOD和定量限。这些都是由使用响应的标准偏差和斜率。
鲁棒性:该方法的鲁棒性是由故意改变pH值等关键的色谱参数和流动相的流速,柱温度和注入量
强度:该方法的强度是由分析整除的同质槽由两个不同的分析师使用类似的操作和环境条件。
结果与讨论
色谱条件的优化
列的色谱条件进行了优化选择的基础上,优化流动相、检测波长、温度和流量和列。被发现是最适合的条件分析观察到较好的分辨率和顶点。移动阶段发现最适合,因为它缺乏有机溶剂。获得了保留时间为3.5分钟的标准图。3和样本图。4。
图3:标准溶液色谱图。
图4:样品溶液的色谱。
该方法的验证
该方法被验证各种参数验证。方法被发现系统适合% RSD为0.78%,尾矿因素是1.51和列效率(N)是3500盘以上每列。这些值都是在接受范围内。检查方法的特异性对空白的干扰。
药物分离表示没有空白和安慰剂的干扰。标准校准曲线绘制线性浓度范围在25岁以上的- 75μg毫升1。r2值为0.999时确认好的线性在选定的浓度范围如图所示图。5。比例恢复被发现在99.79 - -101.75%的范围。详细的结果线性、准确度和精密度列表(表1)。中获得的值相应的限制表明准确和精确的方法。
图5:线性曲线二甲双胍盐酸。
| 线性一个 | |||||||
| 参数 | 值 | ||||||
| λ马克斯 | 233海里 | ||||||
| 浓度范围(m毫升1) | 25 - 75 | ||||||
| 相关系数 | 0.999 | ||||||
| 回归方程 | y = x + 15521 58213 | ||||||
| 精度 | |||||||
| 浓度(%) | 安慰剂(毫克) | 示例wt.采取(毫克) | %恢复(平均数±标准差)b | %相对标准偏差 | |||
| 50 | 68.0 | 250.0 | 99.79±0.40 | 0.003 | |||
| One hundred. | 68.0 | 500.0 | 101.75±0.01 | 0.010 | |||
| 150年 | 68.0 | 750.0 | 100.72±0.53 | 0.014 | |||
| 精度 | |||||||
| 类型的精度 | 平均数±标准差一个 | %相对标准偏差 | |||||
| 盘中精度 | 2948508±1039.48 | 0.03 | |||||
| Inter-day精度 | 2948634±643.25 | 0.02 | |||||
| 可重复性 | 2966157±18571.66 | 0.63 | |||||
答:三个决定的意思。
b:根据三个百分比的复苏复制相同浓度的样品。
表1:线性的光学特性,该方法的准确度和精密度。
该方法被发现从LOD敏感和定量限的值。获得的值是1.5μg毫升1和4.5μg毫升1分别对LOD和定量限。峰面积的值都是在接受范围内按我指导的鲁棒性。乐动KENO快乐彩还在强度的情况下,%为小于2%,表明该方法是崎岖的。总结了鲁棒性和坚固性研究的结果(表2)。股票样品溶液和标准被认为是足够稳定指定的时期。
| 鲁棒性参数 | 复苏的百分比a、b±SD |
| 最优条件 | 100.64±0.63 |
| 流动相流速的变化(mL分钟1) | |
| 1.0 | 99.58±1.09 |
| 1.4 | 99.48±1.37 |
| 列温度(°C)的变化 | |
| 20. | 100.69±1.07 |
| 30. | 101.27±0.62 |
| 流动相的变化(pH) | |
| 3.6 | 100.24±0.38 |
| 4.0 | 100.39±0.70 |
| 注入体积的变化(μg毫升1) | |
| 8 | 99.63±0.70 |
| 12 | 100.42±1.54 |
| 强度参数 | |
| 分析师 | 均值±SD %相对标准偏差 |
| 我 | 101.14±0.1285 - 0.13 |
| 二世 | 101.165±0.1259 - 0.12 |
答:复苏百分比根据最优条件下获得的校准曲线(平均6注射±标准差);
每个样本包含μg 50毫升1(100%浓度)
表2:鲁棒性和强度研究的结果。
结论
在目前的研究中,试图让开发和验证一个简单,高效和敏感的离子对高效液相色谱方法。该方法是准确的,精确的,线性分析的范围。该方法被发现适合测定药物含量配方说。该方法可用于评估商用药物产品的质量二甲双胍盐酸。最重要的方法的优点是流动相不包含有机相,无需样品预处理。结果表明,药物可以完全分开,没有干扰的辅料在剂型。因此,它将作为一个替代常规现有分析方法在制药行业。
承认
作者感谢Shreeji医药国际瓦尔道拉(印度)提供的样本的礼物二甲双胍盐酸。
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