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影响亚洲黑蝎子Heterometrus fastigiousus Couzijn表面变质对某些酶和血液参数

*通信:

穆克什·库马尔C圣雄甘地,动物学,研究生学院,戈勒克布尔- 273009,北方邦,印度,电话:073276 61110;电子邮件:zoologyvr@rediffmail.com。

文摘

在目前的研究中,影响Heterometrus fastigiousus Couzijn(家庭:Scorpionidae)毒液碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)、乳酸脱氢酶(LDH)和glutamate-pyruvate转氨酶(GPT)酶活性;和红色的血液细胞(红血球)计数、白细胞细胞(白细胞)计数、血液血红蛋白,意味着微粒血红蛋白(妇幼保健),包装细胞体积(PCV)和等离子体在实验用下毒的白化小鼠血红蛋白进行了研究。毒液是通过电刺激,其毒性是确定白化小鼠皮下表面变质。老鼠LD50为18.6毫克公斤体重。h . fastigiousus毒液引起显著增加在高山,ACP、LDH和GPT白化小鼠肝组织的活动。这毒液红细胞计数减少和白细胞计数增加,血液血红蛋白,妇幼保健,PCV和血浆血红蛋白。本研究的发现将有助于理解亚洲黑蝎子的机制,h . fastigiousus毒液的毒性。

关键字

Heterometrus fastigiousus;蝎子毒液;溶血;表面变质

介绍

意外被蝎子螫伤的伤口是一个严重的健康贫困社区的问题在世界各地的热带和亚热带地区。1500只蝎子物种分布在世界各地,只有50个蝎子物种有人类被证明是致命的1]。蝎子表面变质的症状取决于物种,年龄,毒液成分和受害者的生理反应。蝎子蛰可能引起当地皮肤反应、神经系统、呼吸系统和心血管疾病。蝎毒是一个鸡尾酒各种多肽与不同的药理和生理活动和发挥其效应对离子通道(2]。亚洲黑蝎子属于属Heterometrus(家庭:Scorpiopnidae)是最大的蝎子在东南亚地区和生活负责大部分的意外刺后的等价物家庭Buthidae。这些蝎子毒液的毒性作用和机制表面变质施加其影响尚未明确。然而,一些科学团体报道一些亚洲黑蝎子的药理作用。h .痂毒液会导致延长和锋利的烧灼感刺痛的网站(3]。Palmaneus gravimanus表面变质导致局部刺激,水肿和瘙痒4]。h . fulvipes毒液诱发hemotoxic效果和抑制acetylcholineesterase活动(5]。h . bengalensis毒液产生不可逆的神经障碍(6]。h . longimanus和h . spinifer毒液产生鼠anococcygeus肌肉的收缩反应(7]。黑蝎子毒液含有高浓度的乙酰胆碱和nor-adrenaline,并导致可逆收缩小鸡二腹肌cervicis肌肉cholineregic和肾上腺素的行动8]。p . gravimanus表面变质增加葡萄糖,肌酐、血尿素氮、丙氨酸转氨酶、肌酸磷酸激酶和乳酸脱氢酶和总蛋白减少,血清中尿酸、胆固醇、钙和磷酸盐的白化小鼠(9]。在目前的调查,黑蝎子的效果h . fastigiousus毒液对酶的影响,研究了在白化小鼠血液参数实验表面变质。

实验程序

隔离h . fastigiousus毒液

活蝎子h . fastigiousus从东方科学商场购买,戈勒克布尔,印度。毒液通过电刺激尾节,溶解在磷酸缓冲(50毫米,pH值7.2)和离心机(MP01、Tarson有限公司、印度)×3000 g和4°C五分钟。上层清液收集、冻干和储存在4°C到使用。毒液蛋白质含量被洛瑞等人估计方法(10]。

毒性测定

h . fastigiousus毒液注射小鼠体重25 g±5 g皮下注射和LD50由Kankonkar决定等等。方法(11]。半数致死量(LD50)是由注射0.1毫升的皮下注射不同的毒液稀释蛋白质。对于每一个剂量,四个白化病老鼠和死亡率用于实验动物治疗24小时后被记录。的LD50代表剂量一半的测试动物死亡。

实验协议血液和酶化验

三套白化病老鼠重25克±5克被用来研究蝎毒的影响。动物组成的第一组12白化小鼠注射40%的24小时LD50和第二组还包括12白化小鼠注射80%的24 h LD50蝎毒皮下注射。两组的老鼠牺牲8 h后表面变质的血液和酶分析。第三组由六只老鼠收到磷酸盐缓冲剂(50毫米,pH值7.2)被用作控制。实验周期结束时,小鼠麻醉使用乙醚蒸气。血液通过心脏穿刺收集管含有抗凝ehylenediaminetetraacetic酸(EDTA)和用于血液分析。肝脏被解剖动物酶分析。

血液分析:测定红细胞计数、血液血红蛋白、妇幼保健、白细胞计数,PCV和血浆血红蛋白是根据Dacie和刘易斯方法(12]。

酶的分析:测定碱性磷酸酶(ALP)和酸性磷酸酶(ACP)活动:高山和机场核心计划酶活性测定肝组织中的Bergmayer(1967)的方法。50毫克的肝组织均质1毫升0.9%氯化钠溶液中,离心机在5000克15分钟在0°C。上层清液作为酶来源。高山酶活性测定,在0.1毫升酶源,碱性缓冲基质添加1毫升、混合和孵化为30分钟37°C。5毫升整除的0.02 M氢氧化钠被添加到孵化混合物。ACP酶活性测定,在0.2毫升酶源、酸缓冲基质添加1毫升、混合和孵化为30分钟37°C。现在,4毫升氢氧化钠(0.1)添加到孵化混合物。黄颜色的强度发展为420 nm。标准曲线绘制不同p-nitro已知浓度的苯酚。酶活性被表示为µ摩尔p-nitrophenol形成了30分钟¹毫克¹蛋白质。

测定乳酸脱氢酶(LDH)活性

肝组织LDH活动是由Annon [14)方法。50毫克的组织均质在1毫升磷酸盐缓冲剂(0.1 M, pH值7.5)在冰浴和离心机在10000 g为30分钟4°C。上层清液作为酶来源。在0.05毫升酶源,0.5毫升丙酮酸基质添加和孵化37°C 45分钟。现在0.5毫升的2,4-dinitrophenylhydrazine的解决方案是添加到混合物。20分钟后,5毫升氢氧化钠(0.4米)增加了在室温下,30分钟。反应混合物的吸光度测量在540海里。酶活性被表示为µ丙酮酸的物质的量减少了45分钟¹毫克¹蛋白质。

测定glutamate-pyruvate转氨酶(三磷酸鸟苷)的活动

GPT肝组织的活动是由瑞特曼和弗兰克尔的(15)方法。50毫克的组织均质在1毫升冷冻蔗糖(0.25米)在冰浴和离心机在3000克15分钟在-40°C。上层清液作为酶的来源。0.1毫升酶源,0.5毫升GPT衬底和0.5毫升2,4-dinitrophenylhydrazine的解决方案是添加和混合物在室温下孵化了15分钟。现在,5毫升氢氧化钠(0.4)补充道,在室温下混合并孵化20分钟。混合物的吸光度测量在505海里。表达的酶活性被单位的h - GPT活性mg-1蛋白质。

统计分析

结果表示为均值±SE的六个复制。学生的学习任务是用来检测显著变化(16]。

结果

毒性测定

半数致死量(LD50)h . fastigiousus毒液是18.6毫克公斤¹体重。

的影响h . fastigiousus毒液对血液学的活动

红细胞计数下降到79.35%和62.38%的控制治疗8 h后24 h LD50的40%和80%H。fastigiousus毒液分别(表1)。血液血红蛋白水平增加到122.12%和140.71%的controlafter 8 h的治疗与40%和80%的24 h LD50h . fastigiousus毒液分别(表1)。妇幼保健水平提高到129.63%和225.52%的控制治疗8 h后24 h LD50的40%和80%h . fastigiousus毒液分别(表1)。白细胞计数增加了117.19%和144.31%的控制治疗8 h后24 h LD50的40%和80%h . fastigiousus毒液(表1)。PCV增加到114.38%和138.91%的控制治疗8 h后24 h LD50的40%和80%h . fastigiousus毒液分别(表1)。等离子体是血红蛋白水平增加到0.7和1.6 g 100毫升¹的等离子治疗8 h后24 h LD50的40%和80%h . fastigiousus毒液分别(图1)。红细胞表面的变化计数、白细胞计数、血液血红蛋白,妇幼保健,PCV和血浆血红蛋白是剂量依赖性(p < 0.05,学生学习任务)。

表1:效果的40%和80%的24小时LD50蝎子h . fastigiousus毒液对红血球计数、白细胞计数、血液Hb,妇幼保健,PCV和等离子Hb白化病老鼠。

的影响h . fastigiousus毒液对肝酶的活动

高山活动的增加138.37%和173.25%的控制治疗8 h后24 h LD50的40%和80%h . fastigiousus毒液分别(表2)。ACP活性增加到144.81%和173.71%的控制治疗8 h后24 h LD50的40%和80%h . fastigiousus毒液分别(表1)。LDH活性的增加132.56%和157.15%的控制治疗8 h后24 h LD50蝎子的40%和80%H。fastigiousus毒液分别(表2)。GPT活性增加到162.75%和228.54%的控制8 h与40%和80%的治疗后24 h LD50蝎子h . fastigiousus毒液分别(图2)。这些酶的活性的变化是剂量依赖性(p < 0.05,学生的学习任务)。

表2:效果的40%和80%的24 h LD50h . fastigiousus毒液在高山、ACP、LDH和GPT活性在白化小鼠肝组织。

讨论

h . fastigiousus毒液红细胞计数减少和白细胞计数增加,血液血红蛋白;meancorpuscular血红蛋白,细胞体积和血浆血红蛋白实验下毒老鼠。红细胞计数减少由于蝎毒的溶血作用,支持增加血红蛋白水平在等离子体13]。这将导致贫血和循环缺氧(12]。增加血液中血红蛋白h . fastigiousus表面变质可能可能是血浓缩的结果大规模释放儿茶酚胺和血管紧张素ⅱ(14- - - - - -19]。增加血浆血红蛋白h . fastigiousus表面变质表明血管内溶血(17]。溶血率很高时,等离子体额外微粒血红蛋白不能被转换成胆红素尽快发布。当血浆血红蛋白浓度超过血红蛋白绑定能力和肾小管能力,多余的自由血浆血红蛋白是过滤和排泄尿液中引起血红蛋白尿。不同的科学团体给予不同的血管内溶血的原因。眼镜蛇的毒液释放一种酶,磷脂酶,将溶血卵磷脂卵磷脂,一个强大的溶血性和细胞毒性物质(17]。由于卵磷脂存在于红细胞,引入溶血性毒液进入人体刺激生产的物质,溶血卵磷脂。

这可能是溶血的原因与蝎子下毒(20.]。溶血性蝎毒活性肽也可能与某些结构特点形成的成分肽当接触LD乐动体育官网生物膜(21]。创建一个失衡由于增加分解反监管的分泌激素儿茶酚胺、肾上腺素、去甲肾上腺素、胰高血糖素、皮质醇、甲状腺素、三碘甲状腺氨酸合成代谢激素的减少,胰岛素可能贡献了血红的脆弱性细胞导致溶血(22]。增加意味着微粒后血红蛋白h . fastigiousus表面变质是一个指示性溶血(12]。同样,增加白细胞细胞数也报道Mesobuthus tamulus表面变质可能可能由于心肌梗塞(22]。包装后细胞体积增加h . fastigiousus表面变质在老鼠身上类似于红蝎子表面变质(22]。血管紧张素ⅱ在蝎子的海拔降低,将液体从血管内血容量血管外的隔间,因此增加了细胞体积(19,23]。

高山的膜结合酶是一组协调跨膜运输代谢物和发挥重要作用的蛋白质和某些酶的合成24,25]。高山活动增加刺激肝脏中蛋白质合成的速度可能可能升高的血清蛋白负责。机场核心计划是一种溶酶体酶在分解代谢中发挥着重要作用,病理坏死,自我分解吞噬作用(26]。肝缺血和缺氧增加血浆溶酶体酶的活动27]。机场核心计划活动的增加可能会引起组织坏死和增加血清水平。组织LDH利用葡萄糖能源特别是在厌氧条件。LDH活动增加发生在反应的氧气供应不足建议增加糖酵解活动获得能源在氧气不足的条件(28]。下毒老鼠的肝组织LDH活性增加可能表明增加葡萄糖利用率在氧气不足的条件下。GPT是碳水化合物和蛋白质代谢之间的联系通过催化丙氨酸转换成丙酮酸(29日]。增加肝脏GPT活动的结果压力蝎毒作为所致压力众所周知,增加GPT活性[30.]。在压力下,能源要求太高,恢复,减少糖原水平。保持这种能源要求,以弥补减少糖原水平高,氨基酸中扮演积极的角色,并通过转氨作用碳水化合物代谢反应的前体(28]。

结论

Heterometrus fastigiousus毒液增加高山,ACP、LDH和GPT白化小鼠肝组织的活动。这venomreduced红细胞数和白细胞计数增加,血液血红蛋白,妇幼保健,PCV和血浆血红蛋白。本研究的结果有助于理解亚洲黑蝎子的机制,h . fastigiousus毒液的毒性。这将有助于设计的药理学家药物治疗意外h . fastigiousus表面变质。

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