原文

数量:13 (1)

• 查看PDF
• 下载

大戟属植物的植物化学的和抗真菌特性hirta L对镰刀菌素moliniforme和Phoma sorghina

*通信:

Tapsoba我、实验室的环境和生物有机分析化学(LCAE生物),在这里/海,Ouaga我大学约瑟夫,瓦加杜古03,布基纳法索、电话:+ 22670625536;电子邮件:issa.tapsoba@gmail.com

文摘

在这项研究中,整个植物大戟属植物hirta。L是植物化学的研究和抗真菌特性。Hydroethanolic提取的大肠hirta被分数不同的有机溶剂和分析化学筛选、抗氧化和抗真菌的活动镰刀菌素moniliforme和Phoma sorghina。结果表明,大肠hirta L含有单宁,类黄酮,生物碱和萜类化合物。乙酸乙酯和丁醇分数的大肠hirta L高酚类化合物含量分别为3.675和3.588毫克每克提取没食子酸当量。抗氧化活动收紧的评估显示,这两个分数含有4.147毫克和3.977毫克每克Trolox等价的提取,分别。抗真菌活性研究镰刀菌素moniliforme和Phoma sorghina显示5毫克/毫升的这些提取物抑制菌丝生长的真菌分别为58.33%和44.67%,表明这些提取物可用于谷物保护。

关键字

大戟属植物hirta L;化学筛选;镰刀菌素moniliforme;Phoma sorghina;抗真菌

介绍

谷物是世界上使用最广泛的粮食作物,特别是在布基纳法索,玉米、高粱和小米是培养。谷类植物面临问题的生产造成重大损失的生产。农民通常应用控制植物病害的化学产品。虽然化学药剂是有效的,他们不断使用导致电阻的发展各种类型的微生物(1,2]。因此,许多研究人员寻找替代方法代替化学农药(3- - - - - -5]。植物几乎构成丰富的生物活性物质的生物杀虫剂的开发更安全的疾病控制代理。

大戟属植物hirtaL (大肠hirtaL)已经在布基纳法索和传统广泛用于治疗许多疾病,如腹泻、痢疾、血吸虫病、哮喘、支气管炎等。6,7]。大肠hirtaL研究化学,发现含有类黄酮属于黄酮醇类型如quercetol、山柰酚、槲皮素、酚酸。此外,许多植物固醇和三萜等taraxerol,α和β-amyrineβ-sitosterol,菜油甾醇和豆甾醇8被发现在大肠hirtal .其他药理研究报道存在isoquercetrin luteolin-7-O-glucoside,(-)表儿茶素没食子酸盐和(-)-epigallocatechine没食子酸盐大肠hirtaL提取物(6,9]。众所周知,植物提取物的生物性质取决于他们的植物化学的成分3,6,7]。

目的,我们这里大戟属植物的植物化学的调查报道hirta l .这些植物的抗氧化和抗真菌活动正在研究镰刀菌素moliniforme和Phoma sorghina、双种子真菌。

材料和方法

植物提取的材料和制备

大戟属植物hirta L收集在干燥季节,在2月中旬在瓦加杜古字段,样品已经被确认的珍妮Millogo教授实验室的植物学家生物学和蔬菜生态(LABEV) Ouaga我公关。大学的约瑟夫·KI-ZERBO。整个工厂用水洗了仔细毫Q,在室温下在实验室干(35°C)在96小时和粉。一百克粉被己烷然后脱脂(3×250毫升)。植物材料已经被过滤分离和干燥。这粉50克500毫升的混合乙醇-水介质中对浸渍混合物的比例在20小时80/20 v / v。与纸Wattman No1过滤后,滤液集中在旋转蒸发器获得50°C到150毫升的体积。剩下的水相然后冷冻干燥获得4 g粗提物的名字EB。提取是溶解在150毫升的水milliQ和提取先后与溶剂极性增加。提取完成(3×50毫升)的二氯甲烷(DCM),紧随其后的是(3×50毫升)乙酸乙酯(AcOEt)最后(3×50毫升)的正丁醇(BuOH)。获得的分数被蒸发干燥,然后保存在冰箱进行进一步的研究。对于每一个分数,股票解决方案5毫克/毫升每个实验前准备。

生物材料

抗真菌进行了测试镰刀菌素moliniforme和Phoma sorghina,两种真菌感染相当专业物种谷类食品,如玉米、高粱和小米在热带地区栽培。通常都是模具代理著名在全世界谷物种植开发,确认在布基纳法索。这些真菌在植物病理学实验室被孤立波波Dioulasso,大学的布基纳法索高粱样品收集在该地区在2007年和他们培养土豆葡萄糖琼脂培养基(PDA) (10]。p . sorghina根据以下规定参考32 so-06和镰刀菌素moliniforme与1341年so07-fm参考代码。使用一个5天的旧殖民地,四个菌丝体外植体相同的大小(5毫米)被放置在培养皿的中心和孵化时的热室28°C和在黑暗中保持了10天。

植物化学的筛选

植物化学的筛选进行了不同的提取大肠Hirta定性识别各种有效成分的存在与否。所以,这些成分的存在与否进行了调查后标准植物化学的测试程序,如氯化铁测试单宁和类黄酮,泡沫测试皂甙,Libermann-Burchard测试萜类化合物,Dragendroff测试生物碱醌类和氢氧化钠测试。

总酚的决心

根据Folin-Ciocalteu总酚含量是评价方法(5]。这种方法是基于属性的酚类化合物减少phosphomolybdotungstic试剂或活性Folin-Ciocalteu [5]。每个样本中总酚量是由外推法的标准曲线获得从一开始股票500μg /毫升的没食子酸溶液的稀释水milliQ直到最终浓度的1/128。事实上,在每个测试管,每个样本的添加,25μL股票解决方案和125μl试剂Folin-Ciocalteu (RFC) (0.2 N在蒸馏水毫Q)。5分钟后,100年μl碳酸钠μl (75 g / l)添加和混合物动摇。解决方案被孵化在避难所的光在两个(02)小时。每个浓度是一式三份,吸光度是读三次760海里比较空白由RFC 125μl混杂在一起;25μl甲醇和100μl碳酸钠。

抗氧化活性测定

进行了抗氧化活性根据收紧方法:这种方法是基于化合物降低铁离子的能力(11]。因此,500年μl股票提取溶液混合1.25毫升的插头磷酸盐(6)pH = 0.2米和1.25毫升的亚铁氰化钾溶液(K₃铁(CN) (1%)。30分钟后的孵化50°C, 1.25毫升的酸三氯乙酰(10%)和混合添加离心机离心后10分钟。125年μl期间的上层清液也和混合125蒸馏水毫问25μl FeCl的解决方案₃(1%)水。吸光度在700 nm和比较一个空白。白色的包含500个μl甲醇提取的地方,剩下的其他试剂不变。校准曲线进行Trolox (0 mg / l到200 mg / l)。

抗真菌活性测定

抗真菌活性不同的分数在体外菌丝体生长的抑制作用Phoma sorghina和镰刀菌素moniliforme。每个部分都溶解在二甲亚砜(DMSO)(1%),和测试三个浓度1、3和5毫克/毫升。是使用的培养基土豆葡萄糖琼脂(PDA)。的混合物在一个高压蒸汽消毒30分钟在120°C。冷却后,体积25毫升每个媒体都倒在培养皿的9厘米直径。为了比较结果,控制解决方案是用1% DMSO的蒸馏水作为媒介。菌丝体explantat或无菌盘的直径5毫米的Phoma sorghina和镰刀菌素moniliforme收集到的微生物菌种保藏单位(MCCU)放置在培养皿中包含的中心中有或没有添加测试产品。培养皿培养在28°C在10天内和菌丝体生长测定每两天到10天。评估径向增长涉及跟踪培养皿盖上的两个垂直的直线,它通过外植体的中心。菌丝体殖民地(cm)的直径测量戴在10天后孵化。平均直径计算的三个培养皿。然后使用SAS公司的软件进行方差分析和平均直径真菌进行比较,利用学生纽曼和Keuls多重比较检验基于阈值的5%。实验重复三次,抑制菌丝生长的比例在每个介质计算以下的关系:

%抑制= 100 ((A - b) /)

菌丝体的大小控制

B:大小菌丝体的治疗

结果与讨论

化学筛选

在本部分中,我们探讨化学定性筛选来确定不同的化学组原油中提取和不同的分数大戟属植物hirta L。根据获得的过程详细部分相对于植物化学的筛选。

的结果表1表明,二氯甲烷,乙酸乙酯,丁醇分数和粗提物大肠hirta L含有单宁酸,类黄酮和萜类化合物。这个结果同意之前的作品(6,9这证明大肠hirta L含有大量的黄酮醇衍生物。然而,皂苷(12)和醌类没有检测到任何分数的大肠hirta L。的生物碱在二氯甲烷分数都不存在。这些结果与报道的工作协议帕尔克和钱德13)和Prashant et al。14)显示大肠hirta L。含有生物碱、黄酮类、单宁和酚类衍生品。

表1:结果筛查大肠hirta化学团体。

总酚类化合物(TP)

酚类化合物显示了其潜在的目标在很多研究中得到的抗氧化和抗真菌的活动(15]。为了建立生物活性之间的关系和酚类化合物,酚类化合物的数量已经被Folin-Ciocalteu[评估5)所示的方法和结果表2。

表2:酚类化合物的数量表达毫克每克没食子酸当量的提取。

结果表明,乙酸乙酯和丁醇分数含有酚类化合物的最高数量估计3.675毫克和3.588毫克坚毅不屈的/ g c.a分别提取。这种高浓度的酚类化合物的提取可以解释的单宁和类黄酮,构成大多数酚类化合物。酚类化合物是由乙酸乙酯和丁醇溶剂收集著名的提取类黄酮(16,17]。一个可以观察到表2,少量的酚类化合物在二氯甲烷中获得分数。这可以解释为弱极性的二氯甲烷导致酚类化合物的去除。

抗氧化活性(氧化铝)收紧的方法

不同提取物的抗氧化活性测定使用的校准曲线的方程Trolox遵循(28.672 x + y = 0.0668;R²= 0.9996)。获得的值显示在图。1。

一个可以观察到的图。1所有提取的分数大肠hirtaL表现出抗氧化活性和最好的对应4.147 ET / g和3.977毫克等c / g。的一个相当于Trolox分别在乙酸乙酯和丁醇获得分数。这些结果与酚类化合物的含量高这些分数报告表2(18]。酚类化合物和抗氧化活动之间的相关系数大肠hirtaL提取是非常重要的(R2 = 0.9791),表明97%的提取物的抗氧化能力,是由于酚类化合物衍生品的贡献。这些结果同意以前的工作表明之间的关系总酚含量和抗氧化活动(18- - - - - -20.]。

抗真菌活性

提取物的抗真菌活性的评价大肠hirtaL对镰刀菌素moniliforme和Phoma sorghina是使用菌丝体生长抑制测试完成的。调查是通过以下的影响大肠hirtaL提取物浓度的抑制百分比两种真菌的菌丝体生长。

图。2说明5 mg / L的影响大肠hirtal .提取菌丝体生长的镰刀菌素moniliforme与空白相比(控制)和标准杀菌剂Calthio c,一个可以看到提取抑制的增长镰刀菌素moniliforme。

菌丝生长测量开发导致的决心抑制百分比和结果总结表3。

表3:粗提取液的浓度效应(EB)、乙酸乙酯分数(AcOEt),丁醇分数(buoh)大肠hirta L和Calthio C f的菌丝体生长的抑制百分比moniliforme和p . sorghina。

所示表3似乎很明显,原油提取和不同的分数大肠hirtaL抑制这两种真菌的菌丝体生长。抑制增长的百分比略粗提取液的浓度和不同的分数。这种效应更为高效f . moniliforme比p . sorghina而对于Calthio C,推荐化学杀菌剂拌种剂,抑制这两种真菌的菌丝体生长是总。

在不同的分数大肠hirtaL,乙酸乙酯分数降低的菌丝体生长f . moniliforme至少1毫克/毫升的浓度为40%。这种抑制作用随提取物的浓度达到58.33%会于长滩举行5毫克/毫升的浓度。然而,在p . sorghina这种效果不太明显。事实上,它降低了菌丝体生长p . sorghina从24.33%到44.67%的浓度1毫克/毫升5毫克/毫升的乙酸乙酯部分分别。乙酸乙酯的抑制率与工作报告的分数在协议Gayathri等人表明,乙酸乙酯提取的大肠hirta具有抗真菌活性黄曲霉(21]。酚类化合物的重要数量的乙酸乙酯提取物可以解释其强大的抗真菌的活动在许多研究[22- - - - - -24]。这个结果表明f . moniliforme对乙酸乙酯分数更敏感比吗p . sorghina和之前已经观察到Ilboudo et al。25),展示了类黄酮的抗真菌效果diglycosides隔绝、对这两种谷物真菌同样的提取。两者之间的差异观察真菌大肠hirtaL提取变化可能是由于能力的活性物质的浓度(25,26]。

我们可以通过观察这些结果的抗真菌活性大肠hirta提取相关的酚类化合物。更多,酚类化合物的含量高和抗真菌的活动是很重要的。而提取大肠hirta是由以下的极性溶剂,phytometabolites出现在丁醇醋酸提取是不同的。演示了这两种提取一些抗真菌特性f . moniliforme和p . sorghina。这个结果是在协议与几个作品的文献显示,酚类化合物的抗真菌活性类黄酮在真菌27- - - - - -29日]。

此外,对真菌的菌丝体生长的影响一直跟随每两天使用不同的分数和Calthio c作为标准在5毫克/毫升10天。结果所示图。3和3 b。

在图。3慢毒性活动指出,在不同的提取8天f . moniliforme。8天的抑制达到58.33%乙酸乙酯萃取物的存在。在的情况下p . sorghina,一个轻微的抑制与乙酸乙酯提取观测。事实上,经过2天的孵化率抑制36.95%是观察而在8天的孵化,抑制是45.18%。这意味着的毒性大肠hirta提取物对真菌是由一个营养的影响。这种逆转的浸渍提取效果观察b . aegyptiaca大大减少径向增长c . graminicola,但没有对菌丝体生长的影响p . sorghina。这种差异可以解释所呈现的不同的活动在每个提取的各种化合物。分数是丰富的类黄酮但每种类型的类黄酮糖化并不存在特定的活动对真菌孢子菌丝生长。此外,所示图。1和表3,一个人可以注意,抗氧化剂分数高大肠hirtaL表现出最好的抗真菌的活动。众所周知,抗氧化活动是由酚类化合物(由于激进的消费28]。这个结果可能导致这样的结论:抗真菌的活动相关的真菌产生的氢氧自由基的清除据历经甲级et al。28]。

结论

化学检测报告在这个研究表明hydroethanolic提取的整个工厂大肠hirtaL含有酚类化合物如单宁、黄酮、皂苷、生物碱。乙酸乙酯和丁醇分数更丰富类黄酮通过测定总酚类化合物衍生品确认。酚类化合物的数量之间的相关性和乙酸乙酯抗氧化活动和丁醇的分数大肠hirtaL因为97%的提取物的抗氧化能力是由于酚类化合物衍生品的贡献。此外,我们筛选实验表明,乙酸乙酯和丁醇的分数大肠hirtaL证明抗真菌的活动镰刀菌素moniliforme和Phoma sorghina。结果表明,这种植物中的有效成分必须为进一步孤立的化学特性。

承认

作者承认国际科学项目(ISP)为他们的财政支持在抗真菌天然产品调查研究项目BUF 01。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

引用

1. Hamdache, Lamarti, Badoc。在体外电阻的葡萄孢菌三个杀真菌剂。Belletinde,波尔多医药社会。2010;149:103-14。
2. 许许t .抵抗3 5-dichlorophenyl-N-cyclicimide (dicarboximide)杀菌剂灰霉病病菌葡萄孢菌在作物保护。植物病理学研究。1982;31:133-41。
3. Lefeuvre g的使用药用植物在塞内加尔。
4. Shih MF,程恩华码、沈CR等。分子药理学研究抗炎的行为大戟属植物hirtal . LPS-induced生264.7细胞通过选择性伊诺蛋白质抑制。J Nat医学。2010;64:330-5。
5. 单例六世,Orthofer R, Lamuela-Raventos RM。总酚类和其他氧化剂基质和分析抗氧化剂通过Folin-Coicalteu试剂。方法Enzymol。1999; 299:152 - 78。
6. Basma AA,扎卡里亚Z,拉莎LC, et al。甲醇提取物的抗氧化活性和植物化学的筛选大戟属植物hirtal .亚洲Pac J太多。2011;4:386 - 90。
7. Nacoulma-Ouedraogo噩。药用植物和传统医学实践在布基纳法索:中央高原。瓦加杜古大学。1966;285页。
8. 福尔摩斯。大戟属植物pilulifera。J医药杂志。1923;10:162 - 163。
9. Pioro-Jabrucka E, Pawelczak Przyby杰,et al .酚醛和sterolcompounds积累E.hirtal . 2011; 57:30-7。
10. 棒子,Somda年代,一汽EP, et al。在体外各种当地的植物提取物的抗真菌活性的控制Phomasorghina(Sacc。)Boerema等人,炭疽菌graminicola(Ces)。威尔逊,高粱种子模具病原体在布基纳法索。Tropicultura。2012; 30:103-6。
11. Oyaizu m .研究产品褐变反应:抗氧化活动从葡萄糖胺产品褐变反应的准备。日本J减轻。1986;44:307-15
12. Sidambaram RR, Dinesh毫克,Jayalakshmi等。在体外细胞毒性的研究活动大戟属植物hirta在HEP-2细胞人类的喉上皮瘤。Int J制药制药科学。2011;3:101-3。
13. 帕尔克J,钱德。在体外抗菌活性和植物化学的分析一些印度的药用植物。Turk J杂志。2007;31:53-8。
14. Yadav P,库马尔,Mahour K等al.Phytochemical分析一些indiegenous植物有效的对抗体内寄生虫。J副词实验室Res杂志。2010;1:72-8。
15. Lamien-Meda A LamienCE孔波雷MMY,等。多酚含量和抗氧化活性的14个野生食用水果来自布基纳法索。分子。2008;13:581 - 94。
16. 珍妮弗,Laveena DK, Priya抗菌药物筛选大戟属植物hirtal .,Pedalium骨螺L:一个比较研究。世界制药医药科学。2014;3:1221-6。
17. Kumar年代,Kumar Malhotra R和D。大戟属植物hirta:化学、传统和药用用途,和药理活性。Pharmacogn启2010;61年4点58准时醒来。
18. Athamena提取物的抗氧化和抗菌活性Cuminumcyminuml .黎巴嫩SciJ。2010;11:69 - 91。
19. 土库曼N, Velioglu y,纱丽F, et al .提取条件对总多酚含量和抗氧化和抗菌活性的红茶。分子。2007;12:484 - 96。
20. Wojdylo, Oszmianski J, Czemerys r .抗氧化活性和酚类化合物在32个选定的草药。食品化学。2007;105:940-9。
21. 拉梅什KV, Gayathri抗真菌活性大戟属植物hirtal .花序提取物对黄曲霉行动研究的模式。IntJCurrMicrobiolAppSci。2013;2:31-4。
22. Kosar M,多尔曼HJD,下贱的“。检查水提取物的自由基清除化合物各种简单使用postcolumn衍生化方法。J阿格利司食品化学。2004;52:5004-10。
23. 井上T, Y,杉本Masuda H,等。类黄酮苷获得的抗过敏药效果Menthapiperital .生物制药公牛。2002;25:256-9。
24. Sroka Z, Fecka我Cisowski w .反激进主义的和anti-H2O2从水薄荷提取的多酚类化合物的性质。z naturforsch。C生物科学。2005;60:826-32。
25. Ilboudo啊,棒子,Tapsoba我,等。在体外抗真菌活性的黄酮类diglycosidesMenthapiperita对两个谷物真菌及其肟衍生物。C R詹。2016;19:857 - 62。
26. Kanoun k .乙醇提取的有效性的研究石榴林恩树皮在两个植物病原株:AscocyhtarabieiLABR(通过)。和尖孢镰刀菌f . SP。Radicis-lycopersici。Sci j . 2014:10欧元。
27. Lopesa NP,加藤MJ,吉田m .抗真菌成分的根源Virolasurinamensis。植物化学。1999;51:29-33。
28. 历经甲级R,巴里公里,穆罕默德CL,等。抗真菌和抗氧化活性的比较金合欢高阿和答:auriculiformis心材提取物。J化学生态。2005;31:789 - 804。
29. McNulty J, Nair JJ, Bollareddy E, et al .隔离类黄酮从心材和树脂的李属鸟结核和一些初步的生物调查。植物化学。2009;70:2040-6。