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分子基因诊断的遗传性代谢疾病叫枫糖浆的气味

*通信:

胡赛伊诺娃正在L、部门的医疗生物学和遗传学、阿塞拜疆医科大学、阿塞拜疆、电话:89226234272;电子邮件: (电子邮件保护)

文摘

纯合子的替换的腺嘌呤鸟嘌呤突变被发现在印度生物技术部基因1199核苷酸位置(p, n400 1199 g)。没有BCKDH中确定和BCKDHB基因突变。所确定的突变(1199 g)是一个新的突变并没有包含在任何文学。这突变扰乱了缬氨酸的代谢,亮氨酸和异亮氨酸氨基酸和疾病导致枫糖浆。枫糖浆疾病在阿塞拜疆人口的存在证实了各自的新生儿疾病筛检试验的重要性。

关键字

遗传性代谢障碍;枫糖代谢紊乱;突变;中性基因多态性

介绍

枫糖尿病(报告书)是一个复杂的疾病是遗传的。枫糖尿病是伴随着全部或部分障碍的酶活性,参与三个氨基酸的代谢缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸。如果缬氨酸,亮氨酸和异亮氨酸的新陈代谢被打断,然后囤积体内发生衰变。衰变产物的氨基酸是撤离的身体和有毒。这些毒素与生物amines-ptomaine。

枫糖尿病是一种遗传性异型的疾病与酮酸脱氢酶缺乏酶复合体(BCKAD)。四个单元(1 ?,?1b, ?2 and ?3) are in the content of BCKAD. Mutations in three genes coding those proteins lead to accumulation of organic keto acids in biological liquids and tissues. Gene, which codes E1a subunit of BCKDHA, is mapped on the long shoulder of 19染色体在19个q13.1-q13.2位置;E1b亚基的

在短臂BCKDHA映射染色体6的位置6 q14;? 2印度生物技术部是短臂上的映射染色体1的位置1奔跑;DLD ? 3映射的短臂染色体7短肩7 q31-q33的位置。突变DLD ? 3基因导致诊所形式类似于李综合症(1- - - - - -6]。

50突变的基因是已知的。该频率在世界人口是1:120000-1:290000,杂合子是1 100 - 400年新生儿。比如在一些隔离频率高和1:176新生儿出现。在遗传疾病autosome-recessive类型的。受影响的孩子出生在实际上声音的父母3- - - - - -5]。因此,我们的研究的目的是影响分子遗传研究的两个孩子和枫糖尿病的疾病在巴库的家庭。

材料和方法

静脉血是取自4-yr-old女孩患有枫糖浆疾病。病人的尿液显示阳性反应,4-dinitrophenylhydrazine。孩子出生时间与正常体重。在第一天的新生的尿液的气味枫糖浆和孩子胃肠道的问题。病人的父母是二级亲属(父母兄弟)。

分子诊断是进行启动子,外显子和内含子区域的三genes-BCKDHA BCKDHB和印度生物技术部。静脉血液的研究是在一个包含EDTA或肝素管。

基因组DNA和RNA套件由试剂盒(德国)公司被用于分析。完整无缺的数量和基因组DNA聚合酶链反应反应产品被确定电泳1.7%琼脂糖凝胶(美国力量Pac基本凝胶医生我MEZ) (5,6]。

PCR反应进行了以下条件:96°c - 2分钟(96°C-30I, 55°C-30I, 75°C-2min。这个循环重复25倍),72°C-10min和4°C暂停。聚合酶链反应在一台机器进行生产的公司“专业Thermocycler Biometra”(德国)。一双正向和反向引物被用于每个基因片段。净化后的DNA片段的第一阶段聚合酶链反应一组使用磁铁:“Agencourt很纯粹的XP聚合酶链反应净化”撒96超级磁铁板板。第二放大进行了纯化DNA片段在以下条件:95°C-2min, (95°C-30I, 55°C-30I, 77°C-2min 25周期和72°C 10分钟,暂停4°C。研究了纯化的核苷酸序列片段在“GENOMEL ab Ge XPTM测序”。

结果与讨论

氨基酸的数量在病人的尿液和血浆式样所示表1和2。

表1:氨基酸的数量在病人的尿液式样

表2:大量的病人血浆氨基酸的式样

我们可以看到的表1,除了胱氨酸、色氨酸,其他氨基酸的数量不同于正常的量。缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸氨基酸尿不到正常:缬氨酸- 498结果,66 mkmol / gKre(正常范围,9900年mkmol / gKre - 31600 mkmol / gKre),异亮氨酸结果- 395,97 mkmol / gKre(正常范围,3800年mkmol / gKre - 31200 mkmol / gKre)和亮氨酸- 2032结果,98 mkmol / gKre(正常范围,7000年mkmol / gKre - 57000 mkmol / gKre)。

缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸氨基酸在病人的尿液是1,6;1、3、3、6倍高于正常范围的最高价值,分别。

氨基酸缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的等离子体是远远高于正常范围:缬氨酸- 808结果,55 mkmol / l(正常范围64,00 mkmol / l - 296、00 mkmol / l),异亮氨酸- 636结果,13 mkmol / l(正常范围31日00 mkmol / l - 81、20 mkmol / l)和亮氨酸- 3782结果,02年mkmol / l(正常范围47岁00 mkmol / l - 150、00 mkmol / l)。

缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸在病人的血浆是2,7;7日,9日和25日2倍高于正常范围的最高价值,分别。

因此,对于枫糖代谢紊乱的诊断缬氨酸,亮氨酸,异亮氨酸尿液和血浆氨基酸进行了评价。的比较结果表明,等离子体分析包含更多的信息。分子分析三个genes-BCKDHA BCKDHB和印度生物技术部致病基因枫糖代谢紊乱。根据文献,从50突变,45%被发现在BCKDHA基因(报告书是1型),35%的突变BCKDHB基因(报告书是类型1 b)和20%的胸径基因(报告书是2型)7]。

没有在BCKDHA和BCKDHB基因突变被发现。替换的腺嘌呤鸟嘌呤突变被发现在印度生物技术部基因1199核苷酸位置(p, n400 1199 g)。这突变是纯合的。

因此,确定突变(1199 g)是一个新的突变这不是任何文献所示。这个纯合子突变枫糖代谢紊乱的原因破坏缬氨酸的代谢,亮氨酸和异亮氨酸。

枫糖代谢紊乱的鉴定的生化和分子遗传学方法在阿塞拜疆人证实了各自的新生儿疾病筛检试验的重要性。

结论

枫糖代谢紊乱的诊断,缬氨酸,亮氨酸,异亮氨酸氨基酸尿液和血浆中评估和比较的结果表明,等离子体分析包含更多的信息。

替换的腺嘌呤鸟嘌呤突变被发现在印度生物技术部基因1199核苷酸位置(p, n400 1199 g)。这突变是纯合的。没有在BCKDHA和BCKDHB基因突变被发现。

所确定的突变(1199 g)是一个新的突变没有在任何文学描述。在纯合状态破坏缬氨酸的代谢,亮氨酸和异亮氨酸氨基酸和枫糖代谢紊乱的原因。

枫糖代谢紊乱的鉴定的生化和分子遗传学方法在阿塞拜疆人证实了各自的新生儿疾病筛检试验的重要性。

引用

1. 日内瓦。报告的科学组织。对抗遗传性疾病的诊断。那些报告。1997;865:133。
2. 应用信息:净化GENOMELABTM肿瘤基因测序产品使用SPRIClean SEQR磁胡子。测查量表2000,2000 xl,测查8000,测查8800 &肝仪器贝克曼库尔特。应用程序团队欧洲。
3. 气CS,蔡CR,陈韩,et al .枫糖尿病在台湾的原住民部落汉南岛语族:小说印度生物技术部(E2)基因4.7 kb创始人删除nonhomologous重组引起的第1行和Alu和载频之间的决心。欧洲J哼麝猫。2003;11:931-36。
4. 壮族杰,韦恩RM、苔藓等。小说结构和生化依据突变纯合子以色列枫糖尿病病人。生物化学杂志。2004;279:17792 - 800。
5. 默西河BD,金P,丹纳DJ。人类微(miR29b)表达式控制数量的支链alpha-ketoacid脱氢酶复杂的细胞中。哼Molec麝猫。2005;14:3371 - 77。
6. Mc Kusick孟德尔遗传在人。10日,伦敦。2002;2115年。
7. 胡赛伊诺娃正在LS, Rasulov EM, Aliyeva KA。新案子Bckdhb 508 (? T)基因的纯合子突变枫糖尿病。的进步生物学和地球科学。2017;2:248 - 54。