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微生物种群与非洲面包果的沤麻(Treculia africana)纸浆
- *通信:
- Uzoh简历联邦大学微生物系的技术点B 1526 Owerri,国际海事组织状态、尼日利亚、电话:+ 23434243744,电子邮件: (电子邮件保护)
收到:2017年8月04,;接受:2018年3月23日;发表:2018年3月26日
引用:Uzoh简历,Braide W, Orji乔,et al。微生物种群与非洲面包果的沤麻(Treculia africana)纸浆。Biotechnol印第安纳j . 2018; 14 (2): 161。
文摘
非洲面包果浆和的沤麻微生物与这个过程进行调查。从非洲面包果浆收集的样本间隔2天,镀在不同的媒体特征和隔离和标识。纸浆进行了自然发酵由细菌的生长特点102 - 3.5×1010 CFU / g,酵母10 - 4.5×105 CFU / g,模具102 - 2.8×103 CFU / g和乳酸菌1.0×3.8×102 - 105 CFU / g。pH值范围从5.0到5.4,乳酸含量从0.30%降至0.52%。细菌分离微球菌sp。,乳酸菌酵母,枯草芽孢杆菌,链球菌sp,模具如黑曲霉、根霉stolonifer和酵母、酿酒酵母。的增长微生物完全是被酒精消毒和antibiotic-treated样本。
关键字
Treculia africana;沤麻;浆;微生物;可滴定酸度
介绍
Treculia africana(非洲面包果)是一个大型常绿热带食物树物种属于桑科家庭和属treculia。在西非,发现个别面包树,分散在整个南部雨林区域(1]。树能长到20米高和生产复合水果的大小在树干或年长的分支。水果头是球形的形状和直径0.5米。果实成熟后很难和海绵状结构,包含众多的种子像橙色pip值嵌入在不同深度肉质纸浆(2]。非洲面包果种子的高营养价值。Treculia africana在尼日利亚东部作物主要重要的特别是西非和其他一些地区作为食物来源和收入来源。他们种植不是纸浆纤维,强大的,需要时间来分解3)但是对于它们的种子,尤其富含蛋白质和油(4]。当树的果实成熟了,它落下来处理,让它接受自然发酵/ ret自然。这是通过生物分解为独立的种子肉质纸浆(中果皮)。这个过程是由固体基质发酵纸浆的环境温度(28°C到30°C)一段12-21天堆覆盖。末尾的沤麻时期,随著非洲面包果含有种子分离的核心,用水洗了几次删除ret纸浆和粘液包围着每一个种子。在发酵可能遇到的问题和一些水果,一些批次发酵,而差难以复苏的种子。本研究的进行微生物负责非洲面包果浆的沤麻,这将为发酵剂的发展提供必要的信息。这些发酵剂将可预测的特征可以用商业减少发酵时间。
材料和方法
完全成熟的非洲面包果(沛富)刚倒下的树进行从农场在Emekuku, Owerri微生物学联邦大学的实验室技术,Owerri进行分析。非洲面包果(沛富)离开在实验室自然ret大约12 - 14天。沤麻非洲面包果的pH值和温度监控在此期间。
非洲柔软的面包果测定纸浆(沛富)
沛富的果肉被定期堆和柔软是使用新鲜的样品作为标准来衡量的。软化的程度分类等级从0(意味着没有软化)到5(完全软化)后手动探测使用镶玻璃圆钢直径3毫米的5]。
pH值和总可滴定酸度:非洲十克的发酵面包果浆均质在100毫升蒸馏水和pH值测量。样品匀浆当时滴定pH值8.0(0.1米)氢氧化钠用酚酞作为指示剂。可滴定酸度是表示为乳酸等价物湿重的基础上。
微生物分析:十(10 g)的非洲面包果(沛富)纸浆的随机种子收集的不同部分自然沤麻沛富和均质在无菌捣碎机然后1.0 g的匀浆混合10毫升无菌生理盐水连续稀释和镀。
隔离微生物从沤麻非洲面包果浆(沛富)
营养琼脂(Oxoid),德曼Rogossa夏普琼脂,土豆葡萄糖琼脂和麦芽提取琼脂无菌准备根据制造商的指示和用于隔离细菌、乳酸细菌、真菌和酵母。营养琼脂在30°C孵化24 - 48 h和德曼Rogossa夏普48 - 72 h,土豆葡萄糖琼脂(PDA)和麦芽提取琼脂(MEA)孵化28±1°C(3 - 5天6- - - - - -8]。
识别和隔离的特征
细菌分离株是识别和特征的基础上,文化、形态学、生物化学和克反应。识别方案主要是基于这些的9- - - - - -11]。纯分离真菌被确定使用文化和形态学特征根据标准键真菌识别(8,12]。
结果
有高度的柔软沛富不使用抗生素治疗所示使用抗生素治疗表1。
发酵时间(天) | pH值 | Titratableacidity乳酸(%) | 柔软的一个一个 |
---|---|---|---|
0 | 5.4 | 0.30 | 0 0 |
2 | 5.4 | 0.36 | 0 1 |
4 | 5.3 | 0.85 | 1 2 |
6 | 5.3 | 0.86 | 2 3 |
8 | 5.2 | 0.72 | 3 4 |
10 | 5.1 | 0.65 | 4个5 |
12 | 5.1 | 0.60 | 5个5 |
14 | 5.0 | 0.52 | 5个5 |
一个一个沛富使用抗生素治疗; A-ABF没有抗生素; 没有软化; 完成软化 |
表1:非洲发酵面包果浆的化学性质的变化。
在发酵的纸浆,许多变化发生由于微生物和化学的结合效果。表面变得腐烂的8天以后这并不足以允许容易复苏的种子。的终点发酵(12 - 14th天)观察当时完整的纸浆液化分析的渗透测试。有增加酸度在纸浆的天数进行从5.4到5.0。最多可滴定酸度增加从0.30到0.86在6天,下降到0.52天14所示表1。
四种细菌物种是孤立的。他们贡献的沤麻浆。这些隔离已联系在一起发酵活动(表2)。
测试 | 隔离 | |||
---|---|---|---|---|
A1 | B | C1 | A2 | |
黄色球菌与提高整个殖民地 | 棒在连锁店,细长的殖民地 | 球菌在链,小殖民地 | 白色,棒。 | |
克反应 | - - - - - - | + | + | + |
芽孢染色 | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - | + |
囊染色 | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - |
能动性 | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - | + |
氧化酶试验 | + | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - |
过氧化氢酶试验 | + | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - |
柠檬酸的利用率 | + | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - |
葡萄糖 | + | + | - - - - - - | - - - - - - |
气体 | - - - - - - | - - - - - - | + | - - - - - - |
脲酶 | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - |
凝固酶 | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - |
吲哚 | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - |
甲基红 | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - |
生物 | 微球菌sp。 | 乳酸菌sp。 | 链球菌sp。 | 芽孢杆菌sp。 |
表2:细菌分离的形态和生化特征沤麻沛富。
两个真菌分离(表3)导致的沤麻浆。酵母,酿酒酵母被隔离在浸水过程中。这显示一个重大贡献,这种酵母(表4)。
殖民时期的特点 | 微观隔离代码外观 | 生物识别 |
---|---|---|
高大的白色丝状hypae | Non-septate菌丝X | Rhizopusstolonifer |
黑色孢子白色短菌丝 | 菌丝有隔膜的分生孢子叶座Y | Aspergillusniger |
表3:的描述和识别真菌隔离。
特征 | 隔离z |
---|---|
表面 | 光滑的 |
保证金 | 圆形 |
颜色 | 奶白色的 |
细胞 | 球形或椭圆形 |
革兰氏染色剂反应 | + |
葡萄糖 | + |
过氧化氢酶 | + |
半乳糖 | + |
麦芽糖 | + |
蔗糖 | + |
乳糖 | - - - - - - |
增长25°C | + |
增长30°C | + |
分离鉴定 | 酿酒酵母 |
+ =阳性结果(酸) | |
−=阴性结果(无酸生产) |
表4:形态、文化和生化特征分离的酵母菌株。
主要介绍了细菌表5。微球菌sp.和链球菌sp.最初出现在第一个2天之后乳酸菌sp.和芽孢杆菌sp.主导直到浆完全受潮湿腐烂。
发酵 周期(天) |
总数(cfu / g) | 主要的植物 |
---|---|---|
0 | 102 | 曲霉属真菌sp。 |
2 | 1.1×102 | 曲霉属真菌sp,根霉sp。 |
4 | 1.3×102 | Aspergillusniger,根霉sp。 |
6 | 1.6×102 | Aspergillusniger,根霉sp。 |
8 | 2.3×102 | Aspergillusniger,根霉sp。 |
10 | 2.6×103 | Aspergillusniger,根霉sp。 |
12 | 2.8×103 | Aspergillusniger,根霉sp。 |
14 | 1.5×102 | Aspergillusniger,根霉sp。 |
表5:微生物的数量和组成的细菌在自然沤麻的非洲面包果浆。
总数量的增加发酵天增加。这是最高的10天并拒绝14天(表6)。有14天减少微生物活动表明,纸浆中的营养物质被微生物利用。
发酵周期(天) | 总数(cfu / g) |
---|---|
0 | _____ |
2 | 1.0×102 |
4 | 1.6×102 |
6 | 2.8×103 |
8 | 3.2×104 |
10 | 3.8×105 |
12 | 3.5×104 |
14 | 2.8×103 |
表6:实验室的微生物计数德曼Rogossa夏普琼脂。
根霉sp.孤立只有从第二天到14天曲霉属真菌sp.在场在浸水过程(表7)。
发酵周期(天) | 总数(cfu / g) | 主要的植物 |
---|---|---|
0 | 102年 | 混合的数量微球菌和链球菌的物种。 |
2 | 2.4×102 | Bacillussp Micrococcussp Streptococcussp。。 |
4 | 2.3×104 | Lactobacillussp。,芽孢杆菌subtilis |
6 | 1.6×106 | Bacillussubtilis乳酸菌sp |
8 | 3.0×109 | 枯草芽孢杆菌乳酸菌sp |
10 | 3.5×1010 | 枯草芽孢杆菌乳酸菌sp |
12 | 2.8×108 | Lactobacillussp。,枯草芽孢杆菌 |
14 | 1.8×103 | 枯草芽孢杆菌乳酸菌sp |
表7:微生物的数量和组成的模具在非洲面包果浆沤麻。
有中等数量的增加酵母4.5×10的最多5CFU / g 10极大降低了1.0×10天2CFU / g 14天(表8)。有一个渐进的霉菌计数增加到2.8×103CFU / g在12天之后有14天观察减少值为1.5×102CFU / g (表7)。模具被确定为曲霉属真菌sp.和根霉sp.所主导的沤麻浆。
发酵周期(天) | 总数(cfu / g) | 主要的植物 |
---|---|---|
0 | 10 | 酿酒酵母 |
2 | 1.2×102 | 酿酒酵母 |
4 | 1.8×102 | 酿酒酵母 |
6 | 3.5×103 | 酿酒酵母 |
8 | 4.2×104 | 酿酒酵母 |
10 | 4.5×105 | 酿酒酵母 |
12 | 3.2×103 | 酿酒酵母 |
14 | 1.0×102 | 酿酒酵母 |
表8:数量和酵母在自然沤麻的成分。
讨论
非洲面包果果肉与种子在新鲜状态嵌入到纸浆中。然而,通过发酵、果肉软化和分解从而使种子复苏后容易清洗用水。的微生物相关的沤麻非洲面包果(沛富)纸浆分离和确定为微球菌sp。乳酸菌sp。链球菌sp。枯草芽孢杆菌,曲霉属真菌尼日尔、根霉stolonifer和酿酒酵母。这些微生物主要是发酵微生物并确定在不同的水平和时间在浸水过程中。这个观察同意的(13)报道,石油发酵豆和谁瓜豆荚涉及几个微生物与芽孢杆菌sp。扮演主要的角色。类似的报告的结果是(14他说微球菌和葡萄球菌saprophyticus失败带来的沤麻Colocynthis citrullus豆荚。的微球菌sp.孤立在这工作是短暂的,因为它不存在进一步隔离,描述和识别。有一个缓慢的减少在pH值从5.4到5.0发酵天(表1)。这是因为自然发酵外来细菌的原材料可能是不可取的微生物导致延迟纸浆解体。乳酸有增加的内容发酵时间发展的可滴定酸度(表1)。混合菌群的细菌被发现负责非洲面包果浆的沤麻。七分离纯化和特征,他们中的大多数革兰氏阳性棒和球菌集群和链。他们受到生理生化测试。在隔离中,2是革兰氏阳性杆菌,1 -球菌和1革兰氏阳性球菌。隔离的生理和形态特征给出了表2。真菌分离的特点从沤麻沛富规定表3。然而,酵母(酿酒酵母)被孤立和酵母的形态和生化特征中包含表4。在浸水过程中,有一个显著的增加酵母计数的值4.5×105CFU / g在10天内(表8)。还有在第14天计数增加。这可能是由于在纸浆衬底的损耗。模具数量逐渐增加到最大值为2.8×103CFU / g记录在12th的一天发酵(表7)。这可能是由于它的沤麻浆微不足道的贡献。微球菌sp。和链球菌sp。出现在第一个两天但是不可能孤立的在以后的日子呢发酵(表5)。枯草芽孢杆菌在浸水过程中占主导地位。这一事实芽孢杆菌sp.已经启动的能力发酵单独或组合同样报道了(11]。这支持这项工作的观察枯草芽孢杆菌似乎是主导整个发酵时间的长短,与其他物种的识别。这是因为B。物种(枯草芽孢杆菌)据报道,能够分泌多种水解酶如蛋白酶、淀粉酶和果胶酶11,15,16]。果胶酶会导致植物组织和液化发生在几个杆菌spp包括枯草芽孢杆菌。这强烈果胶酶分解非洲面包果的沤麻浆(沛富),它有一个强大的demucilaginating沛富浆。这增强了浸水过程。酵母孤立沤麻非洲面包树可以生产pectinolytic酶(酵母和细菌)达到他们增长高峰同样天(表5和8)。这个同意的报告17)在他的工作,在可可浆的退化发酵不仅可以通过pectinolytic酶芽孢杆菌产生的sp.但酵母,。枯草芽孢杆菌构成了最重要的一个生物参与这个浸水过程据报道是重要的发酵碳水化合物材料(18,19]。
结论
不同组的微生物和微生物发酵的观察与非洲面包果浆的软化。这将有极大的好处,选择合适的起动文化开始发酵和显著加速浸水过程。
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