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数量:13 (6)

干粉末Unani和阿育吠陀药物收益率显著的DNA的提取

*通信:
Nishat C、制药、世界大学的孟加拉国,绿色道路,达卡,孟加拉国,电话:+ 81 48-858-3005;电子邮件: (电子邮件保护)

收到:2017年11月27日;接受:2017年12月01日;发表:2017年12月04日

引用:Nishat C,取U, Farhad侯赛因博士等。干粉末Unani和阿育吠陀药物收益率显著的DNA的提取。Biotechnol印第安纳j . 2017; 13 (6): 154

文摘

基因组DNA提取植物分子生物学研究是一个重要的一步。这项研究的目的是推荐定制的基因组DNA提取方法对于一些kobiraji药物在孟加拉国。定制的植物基因组DNA提取方法提取的八个不同的阿育吠陀医学粉末如菲兰、Withania somnifera Abroma奥古斯塔,气味清香cumini, Oroxylum indicum, Chrysogenum aurium,黎豆属pruriens和榄仁树属bellirica。提取的基因组DNA的数量在260纳米测量和测试使用Nanodrop®nd - 1000分光光度计和DNA的质量是由水平琼脂糖凝胶电泳用1%的琼脂糖此种缓冲在恒定电压60 V。基因组DNA提取了原始和真正的DNA amplifiable和可用数量的粉末医学测试。从粉末药品获得足够的DNA,但没有结果中发现的电泳随着DNA大小太大。

关键字

基因组DNA提取;电泳;植物

介绍

阿育吠陀、Unani Kabiraj人实践医学在印度和孟加拉国。他们也叫Vaidhya。几乎是一个普遍的遗传物质DNA和这些基因存在于简单的病毒、细菌、植物和动物都是由DNA。这是一个很长的聚合物由数百万核苷酸(1,2]。方法分离DNA依赖于来源,年龄和大小的样本。原理分离的DNA中细胞是使DNA免受其他细胞组件(3]。需要隔离的DNA遗传分析,用于科学、医学或法医的目的4]。植物含有一个数组的次生代谢物。

Kobiraji药物作为样本的DNA提取

Mucunapruriens (Alkushi)

•支持一个健康的中枢和周围神经系统。

•是一种天然来源的左旋多巴(左旋多巴)。

•支持身体的平衡和姿势。

•促进健康的运动技能和协调。

•改善能源和耐力。

•支持智慧。

榄仁树属bellirica (Bahera)水果:泻药,收敛剂、驱虫剂和退热的。

Oroxylum indicum种子:Oroxylumindicum种子中使用传统的印度阿育吠陀医学关节疼痛或风湿病。

Chrysogenum aurium种子:胡芦巴自古以来被作为草药催奶剂。

Abroma奥古斯塔:用于子宫疾病、痛经,关节炎的疼痛,风湿病和糖尿病。

气味清香cumini:Syzygiumcumini的主要功能是,它有助于治疗糖尿病。

菲兰(Amloki):

1。维生素C的来源。

2。关节炎的康复。

3所示。控制糖尿病和高血压。

4所示。预防癌症。

5。抗炎。

Withania somnifera(Ashwagandha):用于焦虑、抑郁压力。降低血液中胆固醇和糖。

当前研究的目的是建立一个DNA提取过程。八个独立的干粉末kobiraji医学植物物种收集;粉末在研钵和研杵碎和转移DNA提取。后提取的DNA, DNA的存在被琼脂糖凝胶电泳检测。NanoDrop机,DNA含量测定(5]。

材料和方法

Kobiraji医学的收集和保存

八种粉医学收集Kawran集市的专业商店门将,Tejgaon达卡(6]。

收获的水果

粉状药物在室温下保存,直到使用。

试剂

Tris-HCl、EDTA、法螺x - 100和5μl核糖核酸酶(10毫克/毫升)被添加到示例由涡流管和混合。Tris-HCl, EDTA和特里同x - 100用于打开细胞的目的。Tris-HCl, EDTA和特里同x - 100被添加到分手膜结构(7]。

过程

组织分解:50毫克的粉医学是磨。

溶菌作用:的混合是在65°C的环境中10分钟削弱细胞壁和细胞溶解。100年μl裂解缓冲了涡流和混合。封闭的管被放置在冰。细胞溶解,过滤列将被放置在一个2毫升集合管。离心过滤柱。仔细过滤列都被丢弃而澄清浮在表面的转移(8]。

DNA结合:使用GD列2毫升集合管。

700年μl拍摄和离心机。流过被丢弃在集合管。自旋基于列的核酸纯化是一种固相萃取法快速净化核酸。这种方法依赖于核酸会绑定到硅在特定条件下的固相9]。

清洗:400洗μl缓冲区添加到Gd列。再一次,这是离心机。流过被丢弃。600洗μl缓冲区添加到Gd列。这是离心机。流经丢弃,回到2毫升集合管。这是离心机再次全速3分钟干列矩阵。

DNA洗脱:洗脱体积减少,洗脱步骤是重复的。洗脱缓冲液的成分是:10毫米Tris-Cl, pH值8.5。

结果与讨论

量提取的水果

DNA提取是根据Geneaid iso评定资格的质量管理系统(表1 - 5)[10,11]。

植物物种 DNA产量
Phyllanthusemblica(Amloki) Sample1 240 ng /µl
Phyllanthusemblica(Amloki) Sample2 181 ng /µl
Phyllanthusemblica(Amloki)样品3 76.2 ng /µl
Phyllanthusemblica(Amloki)示例4 87.3 ng /µl
Withaniasomnifera(Ashwagandha)示例1 88.1 ng /µl
Withaniasomnifera(Ashwagandha)样品2 53.6 ng /µl
Withaniasomnifera(Ashwagandha)样品3 18.5 ng /µl
Withaniasomnifera(Ashwagandha)示例4 33.6 ng /µl

表1:水果中提取使用NanoDrop机器的数量。

ng /µl
示例1 18.9
示例2 20.3
示例3 31.8
示例4 54.8

表2:DNA提取结果Abroma奥古斯塔的根源。

ng /µl
示例1 40.6
示例2 71.1
示例3 51.2
示例4 78.1

表3:从种子DNA提取结果的气味清香cumini。

ng /µl
示例1 43
示例2 21.3
示例3 62.2
示例4 72.1

表4:DNA提取结果从根Oroxylum indicum。

ng /µl
示例1 78.4
示例2 28.7
示例3 20.8
示例4 52.2

表5:种子的DNA提取结果Chrysogenum aurium。

从粉末药品获得足够的DNA,但没有结果中发现的电泳随着DNA大小太大(表67)。

学名Alkushi (Mucunapruriens) 毫微克/微升
示例1 106.5
示例2 574年
示例3 45.1
示例4 623.9

表6:没有结果电泳随着DNA大小太大。

学名bohera (Terminaliabellirica) 毫微克/微升
示例1 111年
示例2 128.4
示例3 165.4
示例4 41.9

表7:没有结果电泳随着DNA大小太大。

提取工具包(试剂盒)方法应用了八个不同的阿育吠陀医学粉等菲兰、Withania somnifera Abroma奥古斯塔,气味清香cumini, Oroxylum indicum, Chrysogenum aurium,黎豆属pruriens、榄仁树属bellirica。

结论

定制的植物基因组DNA提取方法提取的八个不同的阿育吠陀医学粉等菲兰、Withania somnifera Abroma奥古斯塔,气味清香cumini, Oroxylum indicum, Chrysogenum aurium,黎豆属pruriens、榄仁树属bellirica。提取的基因组DNA的量测量和测试使用Nanodrop在260海里®nd - 1000分光光度计和DNA的质量是由水平琼脂糖凝胶电泳用1%的琼脂糖此种缓冲在恒定电压60 V。基因组DNA提取了原始和真正的DNA amplifiable和可用数量的粉末医学测试。从粉末药品获得足够的DNA,但没有结果中发现的电泳随着DNA大小太大。

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