原文
数量:13 (6)干粉末Unani和阿育吠陀药物收益率显著的DNA的提取
- *通信:
- Nishat C、制药、世界大学的孟加拉国,绿色道路,达卡,孟加拉国,电话:+ 81 48-858-3005;电子邮件: (电子邮件保护)
收到:2017年11月27日;接受:2017年12月01日;发表:2017年12月04日
引用:Nishat C,取U, Farhad侯赛因博士等。干粉末Unani和阿育吠陀药物收益率显著的DNA的提取。Biotechnol印第安纳j . 2017; 13 (6): 154
文摘
基因组DNA提取植物分子生物学研究是一个重要的一步。这项研究的目的是推荐定制的基因组DNA提取方法对于一些kobiraji药物在孟加拉国。定制的植物基因组DNA提取方法提取的八个不同的阿育吠陀医学粉末如菲兰、Withania somnifera Abroma奥古斯塔,气味清香cumini, Oroxylum indicum, Chrysogenum aurium,黎豆属pruriens和榄仁树属bellirica。提取的基因组DNA的数量在260纳米测量和测试使用Nanodrop®nd - 1000分光光度计和DNA的质量是由水平琼脂糖凝胶电泳用1%的琼脂糖此种缓冲在恒定电压60 V。基因组DNA提取了原始和真正的DNA amplifiable和可用数量的粉末医学测试。从粉末药品获得足够的DNA,但没有结果中发现的电泳随着DNA大小太大。
关键字
基因组DNA提取;电泳;植物
介绍
阿育吠陀、Unani Kabiraj人实践医学在印度和孟加拉国。他们也叫Vaidhya。几乎是一个普遍的遗传物质DNA和这些基因存在于简单的病毒、细菌、植物和动物都是由DNA。这是一个很长的聚合物由数百万核苷酸(1,2]。方法分离DNA依赖于来源,年龄和大小的样本。原理分离的DNA中细胞是使DNA免受其他细胞组件(3]。需要隔离的DNA遗传分析,用于科学、医学或法医的目的4]。植物含有一个数组的次生代谢物。
Kobiraji药物作为样本的DNA提取
Mucunapruriens (Alkushi)
•支持一个健康的中枢和周围神经系统。
•是一种天然来源的左旋多巴(左旋多巴)。
•支持身体的平衡和姿势。
•促进健康的运动技能和协调。
•改善能源和耐力。
•支持智慧。
榄仁树属bellirica (Bahera)水果:泻药,收敛剂、驱虫剂和退热的。
Oroxylum indicum种子:Oroxylumindicum种子中使用传统的印度阿育吠陀医学关节疼痛或风湿病。
Chrysogenum aurium种子:胡芦巴自古以来被作为草药催奶剂。
Abroma奥古斯塔:用于子宫疾病、痛经,关节炎的疼痛,风湿病和糖尿病。
气味清香cumini:Syzygiumcumini的主要功能是,它有助于治疗糖尿病。
菲兰(Amloki):
1。维生素C的来源。
2。关节炎的康复。
3所示。控制糖尿病和高血压。
4所示。预防癌症。
5。抗炎。
Withania somnifera(Ashwagandha):用于焦虑、抑郁压力。降低血液中胆固醇和糖。
当前研究的目的是建立一个DNA提取过程。八个独立的干粉末kobiraji医学植物物种收集;粉末在研钵和研杵碎和转移DNA提取。后提取的DNA, DNA的存在被琼脂糖凝胶电泳检测。NanoDrop机,DNA含量测定(5]。
材料和方法
Kobiraji医学的收集和保存
八种粉医学收集Kawran集市的专业商店门将,Tejgaon达卡(6]。
收获的水果
粉状药物在室温下保存,直到使用。
试剂
Tris-HCl、EDTA、法螺x - 100和5μl核糖核酸酶(10毫克/毫升)被添加到示例由涡流管和混合。Tris-HCl, EDTA和特里同x - 100用于打开细胞的目的。Tris-HCl, EDTA和特里同x - 100被添加到分手膜结构(7]。
过程
组织分解:50毫克的粉医学是磨。
溶菌作用:的混合是在65°C的环境中10分钟削弱细胞壁和细胞溶解。100年μl裂解缓冲了涡流和混合。封闭的管被放置在冰。细胞溶解,过滤列将被放置在一个2毫升集合管。离心过滤柱。仔细过滤列都被丢弃而澄清浮在表面的转移(8]。
DNA结合:使用GD列2毫升集合管。
700年μl拍摄和离心机。流过被丢弃在集合管。自旋基于列的核酸纯化是一种固相萃取法快速净化核酸。这种方法依赖于核酸会绑定到硅在特定条件下的固相9]。
清洗:400洗μl缓冲区添加到Gd列。再一次,这是离心机。流过被丢弃。600洗μl缓冲区添加到Gd列。这是离心机。流经丢弃,回到2毫升集合管。这是离心机再次全速3分钟干列矩阵。
DNA洗脱:洗脱体积减少,洗脱步骤是重复的。洗脱缓冲液的成分是:10毫米Tris-Cl, pH值8.5。
结果与讨论
量提取的水果
DNA提取是根据Geneaid iso评定资格的质量管理系统(表1 - 5)[10,11]。
植物物种 | DNA产量 |
---|---|
Phyllanthusemblica(Amloki) Sample1 | 240 ng /µl |
Phyllanthusemblica(Amloki) Sample2 | 181 ng /µl |
Phyllanthusemblica(Amloki)样品3 | 76.2 ng /µl |
Phyllanthusemblica(Amloki)示例4 | 87.3 ng /µl |
Withaniasomnifera(Ashwagandha)示例1 | 88.1 ng /µl |
Withaniasomnifera(Ashwagandha)样品2 | 53.6 ng /µl |
Withaniasomnifera(Ashwagandha)样品3 | 18.5 ng /µl |
Withaniasomnifera(Ashwagandha)示例4 | 33.6 ng /µl |
表1:水果中提取使用NanoDrop机器的数量。
ng /µl | |
---|---|
示例1 | 18.9 |
示例2 | 20.3 |
示例3 | 31.8 |
示例4 | 54.8 |
表2:DNA提取结果Abroma奥古斯塔的根源。
ng /µl | |
---|---|
示例1 | 40.6 |
示例2 | 71.1 |
示例3 | 51.2 |
示例4 | 78.1 |
表3:从种子DNA提取结果的气味清香cumini。
ng /µl | |
---|---|
示例1 | 43 |
示例2 | 21.3 |
示例3 | 62.2 |
示例4 | 72.1 |
表4:DNA提取结果从根Oroxylum indicum。
ng /µl | |
---|---|
示例1 | 78.4 |
示例2 | 28.7 |
示例3 | 20.8 |
示例4 | 52.2 |
表5:种子的DNA提取结果Chrysogenum aurium。
从粉末药品获得足够的DNA,但没有结果中发现的电泳随着DNA大小太大(表6和7)。
学名Alkushi (Mucunapruriens) | 毫微克/微升 |
---|---|
示例1 | 106.5 |
示例2 | 574年 |
示例3 | 45.1 |
示例4 | 623.9 |
表6:没有结果电泳随着DNA大小太大。
学名bohera (Terminaliabellirica) | 毫微克/微升 |
---|---|
示例1 | 111年 |
示例2 | 128.4 |
示例3 | 165.4 |
示例4 | 41.9 |
表7:没有结果电泳随着DNA大小太大。
提取工具包(试剂盒)方法应用了八个不同的阿育吠陀医学粉等菲兰、Withania somnifera Abroma奥古斯塔,气味清香cumini, Oroxylum indicum, Chrysogenum aurium,黎豆属pruriens、榄仁树属bellirica。
结论
定制的植物基因组DNA提取方法提取的八个不同的阿育吠陀医学粉等菲兰、Withania somnifera Abroma奥古斯塔,气味清香cumini, Oroxylum indicum, Chrysogenum aurium,黎豆属pruriens、榄仁树属bellirica。提取的基因组DNA的量测量和测试使用Nanodrop在260海里®nd - 1000分光光度计和DNA的质量是由水平琼脂糖凝胶电泳用1%的琼脂糖此种缓冲在恒定电压60 V。基因组DNA提取了原始和真正的DNA amplifiable和可用数量的粉末医学测试。从粉末药品获得足够的DNA,但没有结果中发现的电泳随着DNA大小太大。
引用
- 路易斯·罗伯特·CRC字典农业科学。CRC出版社,美国。2002;ISBN 0-8493-2327-4。
- Schlegel Rolf HJ。百科词典的植物育种和相关科目。霍沃思出版社,美国,2003;p: 177。
- Mauseth詹姆斯·d·植物学:介绍植物生物学。琼斯和Bartlett。2003; p: 271 - 272。
- 以扫K。种子植物的解剖学。约翰•威利父子,纽约;1977年。
- 卡迪数控Stelick年代,棉絮CA。核酸纯化使用microfabricated硅结构。BiosensBioelectron。2003;19:59 - 66。
- MelzakKA、SherwoodCS TurnerRFB, et al。驱动力DNA吸附硅的高氯酸盐的解决方案。J胶体与界面科学。1996;181:635-44。
- 田H, Huhmer房颤,兰德斯JP。硅树脂直接评价和高效extractionof复杂生物的DNA在小型矩阵的格式。分析生物化学,2000;283;175 - 91。
- 沃尔夫KA、Breadmore MC Ferrance JP, et al。向microchip-based固相萃取分离核酸的方法。电泳。2002;23:727-33。
- 阿西夫MH, Lakhwani D,帕沙克年代,et al。香蕉的成熟和未成熟的水果组织的转录组分析识别主要的代谢网络参与水果成熟过程。BMC植物生物学。2014;14:316。
- RamosIN。量化的显微结构的变化在第一阶段空气干燥的葡萄组织。食品工程杂志。2004;62:159 - 164。
- 希利,Furtado,库珀T, et al .协议:一个简单的方法提取下一代测序qualitygenomic顽固的植物物种的DNA。工厂方法。2014;10:10-21。