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数量:12 (3)生物表面活性剂产生微生物隔离和不同的pH值对经济增长的影响
收到:2017年10月12日;接受:2017年10月31日;发表:2017年11月04
引用:Arpita罗伊。生物表面活性剂产生微生物隔离和不同的pH值对经济增长的影响。Res Biosci牧师。2017;12 (3):135
文摘
生物表面活性剂是表面活性分子含有疏水性和亲水性组。由于其两亲性本质属性如发泡,乳化,分散,洗净。由于各种优势的生物表面活性剂在化学表面活性剂等环境友好、低毒性、生物相容性,生物降解能力更高,更高的稳定性,极端等被广泛利用。他们在等行业拥有各种应用程序健康保健、化妆品、生物修复、石油工业等。这些生物表面活性剂是由微生物广泛的细胞外化合物。本研究采取隔离的潜在生物表面活性剂产生菌和pH值对生物表面活性剂的生产。所有的分离筛选生产生物表面活性剂,表面活性剂的存在活动是由驱油技术,乳化指数和CTAB化验。识别潜在的pH值分离优化后完成。
关键字
生物表面活性剂;微生物;驱油;乳状液;CTAB;PH值
介绍
生物表面活性剂是微生物产生的表面活性化合物,他们分泌细胞外或生产他们的表面。它包含两个疏水、亲水部分能够减少界面和表面张力。生物表面活性剂可以有几个结构即糖脂、polysaccharide-lipid复合,霉菌酸、磷脂、脂蛋白/ lipopeptide或微生物细胞表面本身(1]。增加注意力转向从生物表面活性剂的生产源在石油行业由于其潜在的作用,食品加工药理学(2]。生产生物表面活性剂主要取决于特定类型的微生物,但除此之外也有几个因素影响生物表面活性剂产生即pH值、温度、通风等。3]。向周围释放碳氢化合物是否由于人类活动或意外导致了水和土壤的污染。与碳氢化合物污染的土壤动物和植物组织造成破坏的污染物积累组织导致死亡(4]。烃降解微生物产生的各种各样的生物表面活性剂的化学性质和分子大小不同。各种各样的微生物已经显示了生物表面活性剂的活动。微生物能够利用碳和各种有机化合物能源为他们的增长来源。本研究采取隔离的生物表面活性剂产生微生物石油污染土壤和筛选微生物的生物表面活性剂的活动。进一步研究了不同pH值对微生物生长的影响(图1和2)。
图1:筛查方法。
图2:不同的pH值对经济增长的影响。
材料和方法
抽样
大约10 g的土壤样本收集从石油泵区域(Vishal飞地巴拉特石油、新德里)。从15厘米深度土壤取样。样本放在无菌猎鹰管中,储存在4°C后立即买到实验室。
隔离
微生物被孤立在最小盐介质(MSM)。男男含有(1升)0.9 g的Na2HPO4,0.7 g (K2HPO4,2.0 g的NaNO3,0.4 g MgSO4.7H2CaCl啊,0.1 g2,20克的葡萄糖和微量盐(FeSO 2 g / l4和MnSO4)。后添加的所有组件添加蒸馏水和pH值调整到7.2通过使用1 n氢氧化钠。媒介是高压蒸汽压力在121°C和15 psi 20分钟。细菌被使用单菌落分离技术分离。孤立的微生物培养物被储存在4°C为进一步使用。
细菌分离株的物理特性
形态学鉴定:鉴定细菌的形态细胞是由其大小、形状和颜色在营养琼脂板的殖民地。观察记录(表1)。
| 样品名称 | 克的性格 | 形状 | 形态 |
|---|---|---|---|
| SA1 | 革兰氏阳性 | 球杆菌 | 半透明的,褐色色素,形状不规则的殖民地 |
| SA2 | 革兰氏阳性 | 长棒 | 半透明的,褐色色素,形状不规则的殖民地 |
| SA3 | 革兰氏阴性 | 球杆菌 | 半透明的,绿色颜料,形状不规则的殖民地 |
| SA4 | 革兰氏阴性 | 球杆菌 | 半透明的,褐色色素,形状不规则的殖民地 |
| SB1 | 革兰氏阴性 | 球杆菌 | 半透明的,褐色色素,形状不规则的殖民地 |
| SB2 | 革兰氏阴性 | 棒在链 | 白色的殖民地,形状不规则的殖民地 |
| 那么 | 革兰氏阴性 | 球杆菌 | 半透明的,褐色色素creamish殖民地,形状不规则的殖民地 |
| 星际2 | 革兰氏阴性 | 小棒 | 白色,形状不规则的殖民地 |
| SC3 | 革兰氏阴性 | 小棒 | 半透明的粉红色颜料、光creamish、形状不规则的殖民地 |
| SC4 | 革兰氏阴性 | 大的棒 | Creamish,不规则形状的殖民地 |
表1:细菌分离株的物理特性。
革兰氏染色法协议:一层薄薄的涂片制备和热固定,然后覆盖着一层薄膜的结晶紫一分钟。然后加入了克碘的一分钟,用自来水洗净。然后再涂片用70%乙醇洗净,用自来水停止脱色。复染色后0.25%的safferanine添加一分钟用自来水和吸干,然后利用100 x光显微镜下检查油浸。观察记录(表1)。
生物表面活性剂生产筛选
孤立的殖民地都测试通过使用三种方法对生物表面活性剂的生产活动。
油扩散分析
50毫升蒸馏水被添加到培养皿,20μl柴油中添加这个培养皿形成一层薄薄的油。这10μl文化上层清液后轻轻放在石油层的中心。位移油层的格式化一个明确的区域表明了生物表面活性剂的存在。驱油的形成是可视化在可见光下,测量后30秒,这与隔离的生物表面活性剂活动。观察记录(表2)。
| 样品名称 | 驱油(厘米) | ||
|---|---|---|---|
| 24小时 | 48小时 | 72 h | |
| SA1 | 2.5 | 2.5 | 3.2 |
| SA2 | 1.5 | 2.0 | 2.6 |
| SA3 | 1.2 | 3.5 | 3.6 |
| SA4 | 2.3 | 2.3 | 3.1 |
| SB1 | 0.0 | 0.0 | 1.5 |
| SB2 | 0.0 | 0.4 | 0.6 |
| 那么 | 1.8 | 1.9 | 3.3 |
| 星际2 | 0.6 | 0.6 | 0.8 |
| SC3 | 2.0 | 2.5 | 2.6 |
| SC4 | 0.6 | 1.0 | 1.6 |
表2:驱油的活性细菌隔离。
乳化试验
2毫升的柴油被在试管中1毫升的文化增加了上层清液和涡为齐次混合2分钟。乳化活性观察24 h后,利用公式计算:
观察记录(表3)。
| 样品名称 | 乳化层(厘米) | 总高度的解决方案(厘米) | %的E24 |
|---|---|---|---|
| SA1 | 0.3 | 2.5 | 12 |
| SA2 | 0.2 | 2.5 | 8 |
| SA3 | 0.4 | 2.5 | 20. |
| SA4 | 0.2 | 2.5 | 8 |
| SB1 | 0.1 | 2.5 | 4 |
| SB2 | 0.0 | 2.5 | 0 |
| 那么 | 0.3 | 2.5 | 12 |
| 星际2 | 0.0 | 2.5 | 0 |
| SC3 | 0.2 | 2.5 | 8 |
| SC4 | 0.2 | 2.5 | 8 |
表3:乳化活性的细菌分离株(24小时后)。
CTAB琼脂板
男男媒体板包含CTAB (cetyltrimethylammonium溴离子(阳离子表面活性剂))和亚甲蓝染料被用来测试这个试验。好是由使用吸管的另一侧。在这些井10μl文化的上层清液倒和盘子是孵化48 h。生物表面活性剂的存在活动显示深蓝色晕的形成。观察记录(表4)。
| 样品名称 | 区域地层(厘米) | 直径的(厘米) | 实际区域地层(厘米) |
|---|---|---|---|
| SA1 | 2.1 | 1 | 1.1 |
| SA2 | 2.0 | 1 | 1.0 |
| SA3 | 2.3 | 1 | 1.3 |
| SA4 | 2.1 | 1 | 1.1 |
| SB1 | 2.2 | 1 | 1.2 |
| SB2 | 0.0 | 1 | 0.0 |
| 那么 | 2.1 | 1 | 1.1 |
| 星际2 | 0.0 | 1 | 0.0 |
| SC3 | 2.0 | 1 | 1.0 |
| SC4 | 2.2 | 1 | 1.2 |
表4:CTAB测定的细菌隔离(24小时后)。
不同的pH值对经济增长的影响的潜在生物表面活性剂产生微生物
细菌分离株(A3)接种在25毫升的厄伦美厄烧瓶内含有二甲基砜媒体在不同pH值即6.6,7.0,7.6和8.0然后文化孵化的温度37°C的轨道在140 rpm瓶72 h。观察记录(表5)。
| 样本A3 | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 24小时 | 48小时 | 72 h | |||||||
| pH值 | OD (cm) | 埃尔(cm) | CZ (cm) | OD (cm) | 埃尔(cm) | CZ (cm) | OD (cm) | 埃尔(cm) | CZ (cm) |
| 6.6 | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - | 2.4 | 1.6/3.2 = 50% | 0.8 | 4.8 | 2.2 / 4 = 55% | 0.9 |
| 7.0 | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - | 2.1 | 1.1/3.2 = 34% | 0.9 | 4.6 | 2.1 / 4 = 52.5% | 1.0 |
| 7.6 | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - | 0.7 | 4.5 | 1.9 / 4 = 47.5% | 0.8 |
| 8.0 | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - | - - - - - - | 0.6 | 3.9 | 2.2 / 4 = 55% | 0.7 |
OD:驱油EL:乳化层CZ: CTAB区形成
表5:不同的pH值对经济增长的影响。
结果与讨论
土壤石油污染区域收集。生物表面活性剂产生细菌的分离筛选潜在的活动。的隔离8显示良好的驱油活动,乳化活性和CTAB活动表明他们的石油降解活动的潜在作用。最高的八十一隔离了驱油活动,乳化活性和CTAB活动为pH值优化选择实验。pH值优化表明,文化SA3产生最多的生物表面活性剂在pH值6.6和活动生物质获得在低pH值7.6,0.30724 g和生物表面活性剂比pH值6.6,但活动生物质高即0.93172 g。也观察到高酸度即8降低细菌的增长生物质例如0.24301克以及生物表面活性剂活动(5]。孤立杆菌lichneformis矿物盐介质和显示,微生物降解原油的能力是唯一的碳和能源为他们的增长来源。(6]孤立五微生物和他们的生物表面活性剂筛选活动通过使用驱油和血液溶血法(7]孤立42微生物和他们的生物表面活性剂筛选活动,这些隔离只有6显示最高CFU和生物表面活性剂的生产。
结论
本研究得出细菌分离株的潜在能力作为生物表面活性剂产生代理。他们生长在MSM中并显示潜在的石油降解和生物表面活性剂的生产活动。十个孤立的八个显示生物表面活性剂的活动和一个隔离即SA3显示的最大活动进一步利用pH值变化的研究。也观察到,pH值的增加会抑制微生物的生长以及生物表面活性剂的生产。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
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