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数量:4 (1)DOI: 10.37532 / tsmy.2022.4 (1) .133

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研究n端外膜孔蛋白(绿脓杆菌重组)

*通信:

Laoure Nuchika
Ekiti州立大学微生物系Ado Ekiti,尼日利亚;电子邮件:nuchika.l@esu.ng

文摘

铜绿假单胞菌是迅速发展的细菌会导致灾难性的感染,在免疫力低下的人。由于其强大的抗生素耐药性,治疗感染患者是具有挑战性的,如果不是不可能的。开发一个有效的疫苗接种对铜绿假单胞菌是一个关键的步骤,解决这个问题。鲍曼不动杆菌是类似的不稳定状态。几个候选疫苗研究了迄今为止,但没有批准疫苗尚未上市。外膜蛋白F (OprF)作为孔蛋白毒性中发挥着重要作用,是铜绿假单胞菌的一个最重要的抗原。先前的研究主要集中在OprF的c端肽聚糖结合区域作为候选疫苗。OprF的氨基端孔蛋白域作为一个潜在的探索疫苗接种候选人对铜绿假单胞菌在目前的调查。超表达大肠杆菌的histidine-tagged重组n端OprF紧随其后使用金属亲和层析纯化。瑞士白化小鼠的免疫反应是评估后接种卡介苗(BCG)和明矾。免疫动物产生抗原IgG1和IgG2a抗体和防止感染临床分离铜绿假单胞菌和a . baumannii表达OprF。用免疫印迹和整个细胞酶联免疫吸附试验、血清从接种小鼠显示大与病原体(ELISA)。据我们所知,这是第一个研究表明OprF的n端结构域是两个感染免疫原性足以抵御。

关键字

OprF,铜绿假单胞菌、不动杆菌疫苗,外膜。

介绍

铜绿假单胞菌是革兰氏阴性细菌。绿脓杆菌是一种常见的和机会导致health-care-associated病原体感染像中央line-associated血液感染,ventilator-associated肺炎,catheter-associated尿路感染,手术部位感染,可以入侵和致命的削弱了患者的免疫系统。铜绿假单胞菌也它生活个体与各种阻塞性呼吸道肺疾病,包括囊性纤维化(CF)和相关的慢性感染是这些患者的发病率和死亡率的主要来源(1]。

因为铜绿假单胞菌许多经常使用药物的耐药性,迫切需要新的抗菌方法来对付这些感染。由于铜绿假单胞菌的非凡的能力来创建或获取新抗生素耐药性机制,避免感染疫苗接种是一个可信的和有前途的战略打击铜绿假单胞菌的抗生素耐药性。革兰氏阴性细菌的外膜蛋白(OMPs)有吸引力的候选疫苗,因为他们揭示细菌表面的抗原表位,可以通过宿主的免疫识别系统(2]。

超载比蛋白质是高度保守的,抗原与所有铜绿假单胞菌血清型,使它们适合疫苗研发的免疫原。OprF non-lipoprotein OMP在铜绿假单胞菌是最普遍,及其氨基酸序列被发现是大幅守恒在所有病原和环境压力(3]。

我们之前报道使用一个优化大肠coli-based无细胞表达系统的合成脂质体重组的长篇OprF proteoliposomes铜绿假单胞菌的蛋白质。我们表明,融合重组proteoliposomes到先前拴在脂质双分子层膜导致OprF的集成,至少在本土封闭形状,利用中子反射计和阻抗谱。我们调查的生物化学和生物物理性质这些OprF重组proteoliposomes在这项研究[4]。

我们观察到,在体外蛋白表达的存在脂质体与一个特定的脂质成分的调整OprF本土封闭和不寻常的活跃开放的构象,从而导致mega-pores在脂质体膜的发展。在一个鼠标模型铜绿假单胞菌急性肺感染,然后,我们评估了疫苗接种proteoliposomes OprF全长蛋白的潜力,暴露OprF所有的本地构象抗原表位。值得注意的是,我们可以保护小鼠免受没有先前的部分错误折叠的黏液状的应变OprF疫苗已经能够实现疫苗接种(5]。

结论

应对越来越多的铜绿假单胞菌感染,预防疫苗是迫切需要的。尽管广泛的努力产生疫苗接种对铜绿假单胞菌,目前还没有这种疫苗。外膜蛋白质,鞭毛蛋白,pili外毒素,铁收购蛋白质,脂多糖,和分泌型装置都是调查铜绿假单胞菌的候选疫苗。疫苗被杀和被减毒活疫苗也被调查。由于保护和效力的抗原性不同临床菌株血清型,外膜proteins-based疫苗的开发尤其承诺限制铜绿假单胞菌感染。这是第一次的氨基端孔蛋白领域研究了铜绿假单胞菌OprF作为一个单一的候选疫苗,我们的知识。它的重要性一直被低估,并可以理解文献中。总的来说,我们发现有趣的潜在使用疫苗拥有OprF铜绿假单胞菌和a . baumannii菌株。oprf25 - 200研究有两个安全完善的佐剂,BCG和明矾。增加保护,需要更多的测试不同佐剂。其他潜在的铜绿假单胞菌抗原可以调查结合oprf25 - 200为了增加疫苗接种功效。

引用

1. 陈Z,崔Y,梁丫,et al。临床前研究IL-21重组蛋白质的生产效率,通过一个两步稀释重折叠方法。Int Immunopharm。2013; 16 (3): 376 - 381。

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2. 多布斯TE Guh AY,奥克斯P, et al。爆发的铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌在门诊化疗中心血液感染。Ame J感染Cont。2014; 42 (7): 731 - 734。

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3. Fito-Boncompte L, Chapalain Bouffartigues E, et al。完整的毒性铜绿假单胞菌需要OprF。Infec Immun。2011年3月,79 (3):1176 - 1186。

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4. 哈里斯G,郭LR、林CK等。一只老鼠模型的鲍曼不动杆菌使用临床孤立hypervirulent应变相关的肺炎。Antimicro代理化疗。2013;57 (8):3601 - 3613。

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5. 哈桑R, El-Naggar W, Abd El-Aziz点,等。与外膜蛋白免疫(OprF和OprI)和鞭毛蛋白B保护小鼠免受肺部感染黏液状的和nonmucoid假单胞菌绿脓杆菌。51 J微Immun Infec。2018; (3): 312 - 220。

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