摘要

柱前衍生反相高效液相色谱法测定拉科沙胺原料药中d -丝氨酸的痕量及n - fmoc - d -丝氨酸衍生物的质谱分析

作者(年代):J.Sreenivasulu, P.Venkata Ramana, G.SampathKumarReddy, CH.V.S。Nagaraju, S.Thirumalai Rajan, S.Eswaraiah

建立了反相高效液相色谱法(RP-HPLC)，并对拉科萨酰胺原料药中d-丝氨酸的含量进行了测定。以9-芴甲基氯甲酸酯(FMOC-Cl)为衍生剂，进行柱前衍生化。n - fmoc - d -丝氨酸衍生物在265 nm处具有最大吸收(Lambda max)。HPLC法采用YMC-Pack Pro C18, 150 X 4.6mm, 3 μ m粒度分析柱。柱温控制在25℃。这是流速为1ml /min的梯度洗脱法。所建立的高效液相色谱法条件能够从未反应的FMOC-Cl和原料药相关杂质中分离出n - fmoc - d -丝氨酸。n - fmoc - d -丝氨酸的保留时间约为6.2分钟。该方法在指定范围内(0.7Â - 7 ppm)是线性的，准确的，并且基于分析物(n - fmoc - d -丝氨酸)在标准和样品中的稳定性。检测限为0.28 ppm，定量限为0.7 ppm。