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摘要

为了更好地理解植物凝集素的生物学功能:赤藓种子凝集素内源受体的检测与鉴定

作者(年代):Emadeldin Hassan E.Konozy, Shobhana V.Bhide

尽管对植物凝集素的研究已经完成了一个世纪,但其在自然界中的作用仍然难以捉摸。采用亲和层析法,研究了不同ph值下赤红种子凝集素(EiSL)与内源伙伴的结合以及固定化赤红种子提取物(EiSE)中固定化ConA的结合。在pH值为7时,较少的蛋白质与EiLS结合强烈,涉及糖特异性、离子和疏水相互作用。然而,在pH值4.6时(更接近体内条件的pH值),大量蛋白质仅通过糖特异性相互作用与EiLS相互作用。EiSL的内源受体被鉴定为糖苷酶、酸性磷酸酶和或可能的储存蛋白。â-半乳糖苷酶通常不与凝集素共享蛋白质体内的定位,每周与EiSL相关,而水解酶如á-galactosidase, á-mannosidase, n -乙酰-â-Dglucosaminidase和酸性磷酸酶,已知驻留在蛋白质体内,被强烈保留在固定化EiSL上。为了测试凝集素-内源性受体相互作用的特异性,我们固定化了刀豆素A (ConA)。在pH 7.0时将EiSE加载到ConA- speharose上,然后洗脱结合的伙伴,结果鉴定出几种通过其糖结合能力与ConA相互作用的糖苷酶。在pH 4.6时,固定化的ConA只能通过离子相互作用识别来自meise的受体。这些结果在植物凝集素生物学意义不明的背景下进行了讨论。


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