摘要

发芽鹰嘴豆种子ïÂ。Â′-淀粉酶的纯化与鉴定

作者(年代):Niranjan Kumar Sana, shanawazur Rahman博士，mehedi Hasan博士，Bidhan Chandra Sarkar博士，entazul Huque博士，Ranajit Kumar Shaha

在72小时后萌发的鹰嘴豆种子中，发现丰富的淀粉溶解活性是由于á-amylase。从发芽鹰嘴豆(Cicer arietinumL.)种子中经30-50%硫酸铵分离，deae -纤维素和SephadexG-75凝胶过滤层析至均质状态，经板凝胶电泳证实。酶的纯度为68.3倍，得率为总活性的72.4%。经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和凝胶渗透色谱分析，纯化的酶是一种表观分子质量分别为42和45 kDa的糖蛋白。从发芽鹰嘴豆中纯化得到的淀粉酶经EDTA和糖蛋白确证为ï ` `型。糖蛋白含糖量为2.7%。该酶对直链淀粉和支链淀粉的水解活性分别为96%和63%。该酶对麦芽糖和麦芽四糖没有作用。纯化后的á-amylase的最适pH值为7.0，最适温度为370C。Ca2+、Fe3+、Mn2+、Na+等金属离子对淀粉酶活性有促进作用，Cu2+、Fe2+、Zn2+对淀粉酶活性有促进作用;Hg+、Ag+、Mg2+和K+对酶活性有中度抑制作用，Li+、Cd+对酶活性有轻度抑制作用。With increasing concentration of EDTA and urea, the activity of the purified enzyme decreased sharply. The Km value of this enzyme was found to be 0.28%for starch as substrate.