摘要

日本长须鱼内脏胰蛋白酶的分离与鉴定

作者(年代):Krishna Prasad Nooralabettu, Adel DÃ Â ' cunha, Priyanka Miranda, Swetha Nayak, Anantharamakrishna

从日本刺鳍鲷(Nemipterus japonicus)幽门盲肠中纯化胰蛋白酶，并进行了同源性的鉴定。从组织中回收胰蛋白酶的最佳方法是:在3000转/分下均匀化10分钟，然后在10000转/分下离心30分钟，在45%硫酸铵饱和水平下沉淀，随后使用Sephacryl S-200, DEAE-cellulose和Sephadex G-50进行层析。酶的分子质量为25kDa，以Ná-p-tosyl-L-arginine甲基酯盐酸盐(TAME)为底物表现出酯酶活性。胰蛋白酶催化活性的最佳温度为60℃，最佳pH值为8，高于60℃，低于pH值6，酶活性急剧下降。在pH为8的30℃下，在10mM浓度的CaCl2存在下预孵育的胰蛋白酶剩余活性稳定达2小时，但在pH为8的30℃下，在10mM浓度的edta存在下，酶活性在5小时内急剧下降至可忽略不计的水平。