文摘

欧元2018年生物技术:糖基化和物化性质的影响anti-HER2分子的生物活性

作者(年代):Sourav Majumdar, Jayachandran Ramalingama Sunil Gairolaa

背景:一个anti-HER2分子的生物活性是深刻影响的微观不均一性N-linked多糖概要文件。小改变多糖anti-HER2分子在翻译修饰的剖面显示对其生物活性产生影响,药物动力学(PK)以及稳定的分子。anti-HER2分子的复杂性在多糖模式进一步鼓励新的分析挑战的需要在评估可比性与创新者分子最近的场景。目标/目的:比较多糖配置和绑定动力学包括电荷变体抗HER2分子与创新者分子异质性分析的目的是为当前的调查。方法:在目前的调查,PNGase F消化anti-HER2分子随后UPLC分析正常相液相色谱条件下使用一个平台方法建立各种多糖的色谱资料残留物,如G0 G0F, GIFa GIFb, G2F。此外,绑定与HER2受体在体外条件下通过Biocore T200一样展示绑定动力学分析评估。此外,负责变体异质性受到的广泛的描述评价anti-HER2分子相比,创新者分子。结果与讨论:Anti-HER2分子质量148 kda对创新者在多糖分子纯化,比较分析了占主导地位的残留物,这代表了90%的糖基化的Anti-HER2分子。的终端galactosylation和fucosylation CDC和ADCC活性多糖残留影响,分别。聚糖剖面的变化可以影响生物活性。进一步,anti-HER2甘露糖含量高的分子显示早期PK间隙和提供了一个强有力的影响。此外,绑定与HER2受体在体外条件下通过Biocore T200一样展示绑定动力学分析评估。 The dynamic binding nature of anti-HER2 molecule (6.21x10-10M) and innovator molecule (6.95x10-10 M) showed the closeness of KD value. Moreover, the weak binding of acidic variants with HER2 receptor also provides an impact on ADCC activity and hence, charge variant analysis was shown to be equally important to demonstrate the efficacy of the anti-HER2 molecule. Acidic variant (K0, deamidated Asn) and basic variants (K1, K2) were determined by cation exchange色谱法(CEX)和酸性变异的百分比(< 35%)评估基于在UHPLC阳离子交换柱分离系统。比较进行了基于参考标准峰的反应在完全相同的条件下,确定酸变异的百分比。结论:总体来说,内部anti-HER2分子的功效和可比性方面进行评估对创新者? ? ?分子和证明其候选人? ? ?为? ? ?在医药治疗领域。