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，卷:14(3)

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脉冲场凝胶电泳分离DNA大分子的研究

*通信:

Lillen约翰武汉理工大学核酸系医学南非，Rondebosch，南非，E-mail:(电子邮件保护)

摘要

Pulsed-field凝胶电泳(PFGE)，或钳位均质电场电泳(CHEF)，可能是一种新型凝胶电泳对DNA大分子的分配进行排序。三支管与蠕动泵组合用于脉冲场凝胶缓冲液分布的比较电泳(但是脉冲场凝胶电泳的出现)。

关键字

电泳;大分子DNA;脉冲场凝胶电泳;缓冲

简介

这可以通过在特定的时间间隔交替阳极和阴极来实现，这意味着DNA粒子需要在电场中重新调整自己，以便在晶格中前进。小原子比大原子排列得快得多，这很残酷，因为它们在预定的时间内覆盖了更大的范围。DNA原子的分裂取决于不同变量的排列:电压、运行时间、缓冲液浓度、温度以及阳极和阴极变化的快慢。由于PFGE协议的运行时间和周期性的高电压，稳定的moo缓冲温度是战略胜利的关键。这些哞温度和长运行时间显示了PFGE设置中用于传输缓冲布置的管的一个有趣的挑战[1]。

由于该装置在冷缓冲下持续使用长达260小时，因此选择合适的油管以避免任何并发症(撕裂、气泡排列和泵送功率的不幸)是最基本的。硅胶管磨损得特别快。以这种方式，这个测试将出现在事件中，他们可以取代一个更强的。将对三种用于蠕动泵的管子进行比较，以确定它们在PFGE领域中的适用性。

拍场凝胶电泳(PFGE)长期以来一直被认为是表征众多致病生物以及细菌亚型的“金标准”物种导致污染突然爆发。本文概述了PFGE的基本标准，并结合了在PFGE齿轮中使用的独特阴极布置的大多数偏好和障碍及其对DNA电泳划分的影响。令人惊讶的是，我们在这里总结了我们在创建和利用小型化PFGE框架方面已经学习了20多年的最重要的假设和可行的角度。此外，我们还研究了与PFGE琼脂糖凝胶中DNA重新定位相关的假设观点。这是在CHEF缩小凝胶和迷你室中模拟DNA电泳设计进行探索计划和优化的前提。标准和小型化PFGE框架之间的基本比较，以及凹版固定化DNA规划的酶和非酶策略，在整个审核中都给出了。此外，还讨论了PFGE目前的应用、偏好、障碍和战略的未来挑战[2]。

脉冲场凝胶电泳(PFGE)是一种强大的基因分型技术，用于用独特的限制性内切酶消化大分子DNA，并在周期性改变方向的电场作用下应用于凝胶基质[3.]。

参考文献

1. 张志强，张志强，张志强。绵羊逆转录病毒Env蛋白对逆转录病毒载体失活的影响肺表面活性剂，离心，冻融循环。中国病毒学杂志，2001;75(18):8864-8867。
2. 费普斯博士，达马托杰，勃朗特B.多次冻融和不同温度对人体反应性的影响免疫缺陷病毒抗体采用三种检测方法。中华病毒学杂志，1988;20(2):127-132。
3. Grecz N, Hammer TL, Robnett CJ。冻融损伤:大肠杆菌DNA双链断裂的证据。生物化学学报，1980;29(3):339 - 344。