简短的沟通
数量:16 (3)蛋白质聚合的特征是纳米技术、AFM、DLS,散射光谱
秦文君Li Mitu C Acharjee和Haopeng李
美国阿肯色大学
电子邮件:jialili@uark.edu
文摘
蛋白质可以在拥挤的解决方案,在高浓度时,或固定在表面细胞还有函数。蛋白质,另一方面,往往凝聚的,在高度集中批量事故的解决方案。例如,肌红蛋白和溶菌酶,两个小细胞的细胞质蛋白质的活动是由他们的协会chaperonin适当的折叠和展开,这样的例子。Siefker等人已经证明了肌红蛋白和溶菌酶聚合也抑制两种介孔二氧化硅材料的孔隙内,SBA-15 KIT-6。
研究人员利用小角中子散射研究介孔二氧化硅,富含蛋白质数量在不断升级。散射信号是无法区分的卸载二氧化硅低装载。适度的蛋白质的存在不能持续分离孔壁粗糙度的原因低信号的对比。然而,在高负荷,靠近蛋白质的填充密度最大,一个广泛的模式散射光谱诊断的出现物种强烈,non-sterically抑制分子间的相互作用,但没有聚合。这种行为是由液状物增加之间的蛋白质和蛋白质之间的相互作用和孔隙的墙壁,也鼓励稳定而不是聚合,在胞质中看到。
在本文中,我们使用纳米孔设备与AFM和DLS研究蛋白质聚合的过程。? ?乳球蛋白变体(? ?LGa)和神经元τ蛋白被雇佣模型蛋白质。纳米孔设备的基本组件是一个纳米级孔隙直径5到20 nm中创建一个独立的的氮化硅膜由硅衬底分离两个PDMA室含盐溶液。一个稳定的离子电流是由移动的电压纳米孔膜应用于一双(AgCl)氯化银电极。当一个带电蛋白质分子或蛋白质总通过纳米孔,一种蛋白质总有更大的体积比单个蛋白质分子将阻止当前或产生电流下降幅度更大,让纳米孔设备描述蛋白质在盐溶液聚合单分子水平。把蛋白质分子或聚合物的体积估计使用标准的校准纳米孔,已知几何如dsDNA分子。我们表明,固态纳米孔的方法可以测量蛋白质聚合数量和聚合数量分布设置类似于自然水溶液环境中利用一个参考dsDNA分子。纳米孔的研究进行了在不同pH值、温度、盐浓度和应用电压从60到210 mV。我们报告结果self-association和聚合的? ?达到和τ由纳米孔技术,AFM和DLS。
